FOXO3A基因敲除小鼠繁殖鉴定及骨髓造血干细胞表型初步分析

发布时间：2022-01-08 10:32

　　目的繁育和鉴定FOXO3A基因敲除小鼠,选育的FOXO3A基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法杂合型雌鼠与野生型雄鼠交配,选育出杂合型雌鼠和杂合型雄鼠,采用一雄一雌或一雄两雌同笼合养方式进行繁育获得纯合型小鼠;繁育的幼鼠剪趾标号,剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定,鉴定获得100 bp/186 bp两条条带的为杂合型小鼠（FOXO3A+/-）,鉴定获得186 bp条带的为纯合型小鼠（FOXO3A-/-）,鉴定获得100 bp条带的为野生型小鼠（FOXO3A+/+,WT）;采用流式细胞术对鉴定出的野生型和纯合型小鼠进行骨髓细胞分型分析。结果 FOXO3A基因敲除小鼠已成功繁殖鉴定,子代基因敲除纯合型小鼠与杂合型小鼠长势正常,与野生型FVB/N小鼠相比外观、生长发育未见明显差异;已得到一定数量的纯合型小鼠用于后续实验;骨髓细胞计数结果显示,FOXO3A基因敲除纯合型小鼠骨髓有核细胞计数与野生型小鼠相比[（6. 167±1. 424） vs.（10±1... 

【文章来源】：中国比较医学杂志. 2019,29(01)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂与仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 小鼠基因型鉴定
        1.3.2 骨髓细胞检测分析
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 小鼠的繁殖情况
    2.2 小鼠基因型鉴定
    2.3 小鼠的生长情况
    2.4 FOXO3A基因敲除小鼠骨髓计数结果
    2.5 FOXO3A基因敲除小鼠造血细胞表型分析结果
3 讨论



本文编号：3576396