肠道细菌相关代谢产物脱氧胆酸的量效和时效对秀丽隐杆线虫生长发育的影响

发布时间：2022-01-13 02:59

　　目的观察脱氧胆酸对线虫生存和生长发育的影响,了解脱氧胆酸的作用。方法实验对象分为对照组和实验组,其中实验组分为低浓度组、中浓度组和高浓度组。将L1期线虫放于实验组中培养48 h后观察不同浓度的脱氧胆酸对线虫生长的影响,在D0期（幼年成虫期）、D4期（线虫成年后第4天）、D6期（线虫成年后第6天）观察不同浓度的脱氧胆酸对线虫运动能力、抗感染能力、寿命和生殖能力的影响。结果不同浓度的脱氧胆酸对线虫生长的影响未见明显差异。在不同时间、不同浓度脱氧胆酸的作用下,线虫运动能力随着剂量的增加和时间的延长而降低,中高浓度脱氧胆酸可缩短线虫的寿命和降低抗感染能力,并呈剂量依赖性。高浓度的脱氧胆酸可以减少线虫的子代及缩短线虫的产卵时间。结论脱氧胆酸不影响线虫的生长。大剂量的脱氧胆酸对线虫可能存在量效和时效的生殖毒性作用和慢性毒性作用,缩短线虫的寿命,降低线虫的运动及抗感染能力,其作用机制仍需进一步研究。 

【文章来源】：中国微生态学杂志. 2019,31(05)CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

图１脱氧胆酸化学结构图

图２线虫生长周期菌ＯＰ５０ＮＧＭ培养基上，每组设置３个平行，每板１００条左右线虫。待线虫于ＮＧＭ培养基上培养４８ｈ后，计数培养基中存活的线虫数，并在显微镜下观察计数存活线虫中各个发育阶段的线虫数。１．２．５．２线虫的体长将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组培养基上，待其发育到Ｌ４期，用１０％水合氯醛麻醉线虫，用体式显微镜测量线虫体长。每个培养基上测量１０条线虫。１．２．６线虫生存实验１．２．６．１线虫寿命将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组的普通培养基上，待其发育至Ｌ４期，转移到加有ＦＵＤＲ（５－氟尿嘧啶脱氧核苷）的实验组培养基上，每天观察，记录存活和死亡的线虫数，以及观察的时间，直到线虫全部死亡。１．２．６．２线虫运动能力将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组培养基上，分别观察Ｄ０期（幼年成虫期，一般４８ｈ）、Ｄ４期（线虫成年后的第４天）、Ｄ６期（线虫成年后的第６天）的线虫每分钟咽部抽吸频率（ｐｕｍｐｉｎｇ／ｍｉｎ）以及每分钟液体中的摆动频率（ｔｈｒａｓｈ／ｍｉｎ）（将线虫放于新鲜的大肠埃希菌ＯＰ５０上计数每分钟咽部抽吸频率；将线虫放于装有２ｍＬ无菌Ｍ９溶液的培养皿中计数每分钟液体中的摆动频率）。１．２．６．３线虫抗感染能力将已活化的ＰＡ１４菌株涂在加有ＦＵＤＲ培养基上，放于３７℃的恒温培养箱中过夜培养，然后放于２５℃培养箱中放置１０ｈ，待用。将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组的普通培养基上，待其发育至Ｌ４期，转移到加有ＦＵＤＲ并

图２线虫生长周期菌ＯＰ５０ＮＧＭ培养基上，每组设置３个平行，每板１００条左右线虫。待线虫于ＮＧＭ培养基上培养４８ｈ后，计数培养基中存活的线虫数，并在显微镜下观察计数存活线虫中各个发育阶段的线虫数。１．２．５．２线虫的体长将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组培养基上，待其发育到Ｌ４期，用１０％水合氯醛麻醉线虫，用体式显微镜测量线虫体长。每个培养基上测量１０条线虫。１．２．６线虫生存实验１．２．６．１线虫寿命将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组的普通培养基上，待其发育至Ｌ４期，转移到加有ＦＵＤＲ（５－氟尿嘧啶脱氧核苷）的实验组培养基上，每天观察，记录存活和死亡的线虫数，以及观察的时间，直到线虫全部死亡。１．２．６．２线虫运动能力将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组培养基上，分别观察Ｄ０期（幼年成虫期，一般４８ｈ）、Ｄ４期（线虫成年后的第４天）、Ｄ６期（线虫成年后的第６天）的线虫每分钟咽部抽吸频率（ｐｕｍｐｉｎｇ／ｍｉｎ）以及每分钟液体中的摆动频率（ｔｈｒａｓｈ／ｍｉｎ）（将线虫放于新鲜的大肠埃希菌ＯＰ５０上计数每分钟咽部抽吸频率；将线虫放于装有２ｍＬ无菌Ｍ９溶液的培养皿中计数每分钟液体中的摆动频率）。１．２．６．３线虫抗感染能力将已活化的ＰＡ１４菌株涂在加有ＦＵＤＲ培养基上，放于３７℃的恒温培养箱中过夜培养，然后放于２５℃培养箱中放置１０ｈ，待用。将发育至Ｌ１期的线虫放到对照组和实验组的普通培养基上，待其发育至Ｌ４期，转移到加有ＦＵＤＲ并

【参考文献】：
期刊论文
[1]内质网应激介导滋养细胞凋亡在妊娠期肝内胆汁淤积症中的作用及机制[J]. 王海臻,蔡丹纯,廖丹丹,钟梅,高云飞,盛超.  南方医科大学学报. 2018(05)
[2]秀丽隐杆线虫神经免疫相互作用的研究进展[J]. 蔡金玲,蔡金玲,杜丽,马琼,崔玉芳.  解放军医学杂志. 2012(09)
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本文编号：3585933