白念珠菌Sap与伊曲康唑耐药性关系的研究

发布时间：2017-05-12 07:11

  本文关键词：白念珠菌Sap与伊曲康唑耐药性关系的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:1、通过牛血清白蛋白培养基(BSA)检测白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)的活性差异。2、通过动物(小鼠)实验比较白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株的毒力及致病性差异。3、通过实时定量PCR(RT-PCR)比较白念珠菌伊曲康唑耐药组和敏感组SAP2、CDR1、CDR2及MDR1 m RNA表达水平的差异。方法:1、收集临床上可疑的真菌标本,分离、培养、鉴定出白念珠菌伊曲康唑耐药菌株与敏感菌株。用BSA培养基检测白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株Sap活性差异,并作统计学分析。2、将小鼠随机分为3个组(耐药组、敏感组和空白对照组),取白念珠菌伊曲康唑耐药菌株和敏感菌株的菌悬液(或无菌生理盐水)分别注入小鼠的尾静脉,观察1个月(30天),统计小鼠的生存情况及存活天数,计算小鼠的死亡率和生存率。3、RT-PCR检测白念珠菌伊曲康唑耐药组和敏感组菌株的SAP2、CDR1、CDR2以及MDR1 m RNA的表达水平,并作统计学分析。结果:1、共检出白念珠菌菌株40株,白念珠菌伊曲康唑耐药株20株,敏感株20株。所有检测的白念珠菌伊曲康唑耐药株(20株)和敏感株(20株)均有透明环产生,白念珠菌伊曲康唑耐药组Pz值=0.611±0.015,敏感组Pz值=0.667±0.015,两组菌株Sap活性差异具有统计学意义(t=11.935,P0.001),即耐药组Sap活性明显高于敏感组。2、白念珠菌伊曲康唑耐药组小鼠1个月内死亡16只,死亡率是80%;敏感组小鼠死亡7只,死亡率是35%;两组小鼠的死亡率差异有统计学意义(2c=8.286,P=0.004),即耐药组菌株对小鼠的致病性及毒力明显高于敏感组。3、RT-PCR分析白念珠菌伊曲康唑耐药组和敏感组SAP2、CDR1、CDR2及MDR1的m RNA表达量,耐药组SAP2基因m RNA(2.015±0.304)表达水平高于敏感组(0.732±0.215),差异有统计学意义(t=15.425,P0.001)。耐药组CDR1、CDR2及MDR1的m RNA表达与敏感组相比,差异无统计学意义;SAP2和MDR1基因在转录水平有明显正相关(r=0.696,P0.001),CDR1和CDR2在转录水平有明显正相关(r=0.837,P0.001)。结论:1、白念珠菌伊曲康唑耐药组Sap活性高于敏感组。2、白念珠菌伊曲康唑耐药组的毒力及对小鼠的致病性高于敏感组。3、白念珠菌伊曲康唑耐药组SAP2基因m RNA表达水平高于敏感组;SAP2和MDR1基因可能受同一调控机制调节;CDR1和CDR2基因可能受同一调控机制调节。白念珠菌Sap与耐药有一定关系。
【关键词】：白念珠菌 耐药 分泌型天冬氨酸蛋白酶 毒力
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R379.4
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 常用缩写词中英文对照表11-12
• 前言12-15
• 第一部分 白念珠菌菌株的收集、培养、鉴定、体外药敏实验及Sap活性的检测15-27
• 1 材料与方法15-20
• 1.1 菌株来源15
• 1.2 主要仪器和设备15-16
• 1.3 主要试剂16
• 1.4 主要培养基的制备16-17
• 1.5 实验方法17-19
• 1.6 统计学方法19-20
• 2 结果20-24
• 2.1 真菌培养、鉴定及体外药敏实验结果20-22
• 2.2 白念珠菌耐药株和敏感株Sap活性的测定结果22-24
• 3 讨论24-26
• 4 结论26-27
• 第二部分 白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株的毒力及对小鼠致病性的研究27-34
• 1 材料与方法27-29
• 1.1 实验动物27
• 1.2 主要仪器和设备27
• 1.3 实验方法27-28
• 1.4 统计学方法28-29
• 2 结果29-32
• 3 讨论32-33
• 4 结论33-34
• 第三部分 白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株SAP2及外排泵相关基因表达的分析34-45
• 1 材料与方法34-39
• 1.1 主要仪器和设备34
• 1.2 主要试剂34-35
• 1.3 实验方法35-38
• 1.4 统计学方法38-39
• 2 结果39-42
• 2.1 RT-PCR结果39-40
• 2.2 相关性分析40-42
• 3 讨论42-44
• 4 结论44-45
• 参考文献45-51
• 综述51-59
• 参考文献56-59
• 致谢59-60
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果60-61
• 个人简历61

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 叶夏云;敖燕;钟建庭;刘丽;刘冬梅;;白念珠菌的毒力及其对氟康唑耐药性的相关性研究[J];中国麻风皮肤病杂志;2006年07期

  本文关键词：白念珠菌Sap与伊曲康唑耐药性关系的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：359130