us3基因的缺失对单纯疱疹病毒1型毒力和抗凋亡功能的影响

发布时间：2022-02-05 06:39

　　利用CRISPR/Cas9系统使单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type 1,HSV-1）ul7、ul41、LAT基因缺失构建M3减毒株（M3株）,在M3株基础上通过缺失us3得到M4突变株（M4株）。本研究旨在分析野毒株（McKrae株）、M3株与M4株在毒力和抗细胞凋亡方面的差异。结果表明,McKrae组出现明显的临床症状,且100%死亡（P<0.001）,而M3、M4组未出现临床症状。M4组小鼠组织中病毒载量明显低于McKrae组和M3组;病理学检测表明,McKrae组出现蛛网膜出血、胶质小结等现象,而M3、M4组未见病理损伤,M4组炎性因子表达与McKrae、M3组相比也显著下降（P<0.01）;免疫后M4组较M3组出现高水平的中和抗体、γ干扰素（interferonγ,IFN-γ）和白细胞介素4（interleukin 4,IL-4）抗原特异性T细胞;McKrae株再次感染时,M4组小鼠组织中病毒载量明显低于对照组和M3组;在人急性T细胞淋巴瘤细胞中,M4株相比McKrae株和M3株可明显诱导细胞凋亡。 

【文章来源】：微生物与感染. 2019,14(03)

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 毒株及细胞
    1.3 主要试剂
    1.4 增殖动力学实验
    1.5 HSV-1感染小鼠及各项指标检测
        1.5.1 分组
        1.5.2 临床症状观察
        1.5.3 组织病理检测
        1.5.4 组织病毒载量检测
        1.5.5 细胞因子表达分析
        1.5.6 T细胞功能分析
        1.5.7 中和抗体效价检测
        1.5.8 细胞凋亡测定
    1.6 统计分析
2 结果
    2.1 M4株的鉴定及 M3、M4株细胞水平的增殖动力学分析
    2.2 M3和M4株感染BALB/c小鼠均无临床症状
    2.3 us3基因突变可下调M4株在小鼠主要器官中的增殖
    2.4 us3基因突变保持了M3株的减毒特征
    2.5 us3基因突变下调机体炎症反应
    2.6 M3、M4株诱导的免疫反应
    2.7 M4株有更强的抑制体内病毒增殖的能力
    2.8 us3基因功能性抑制可增强M4株诱导的体外细胞凋亡
3 讨论



本文编号：3614754