HIV-1疫苗prime/boost免疫策略的研究

发布时间：2022-05-10 20:06

　　人类最伟大的成就之一就是发展疫苗控制传染性疾病。艾滋病肆虐二十余年至今仍未有有效手段对其预防及治疗,越来越多的证据显示CD8+T细胞介导的CTL（Cytotoxic T Lymphocytes）在控制艾滋病病毒感染中起举足轻重的作用,但是产生细胞免疫对疫苗学而言是一个复杂而艰巨的课题,它包括刺激产生的免疫细胞的强度,长效性以及解剖学分类等一系列问题,近期研究表明连续使用不同抗原呈递体系（heterologous boosting）,即通常所指的“prime-boost”免疫策略,可以刺激高水平的记忆性T细胞的产生,给艾滋病疫苗的研制带来了新的希望。本研究以小鼠为动物模型,使用表达HIV-1 Gag-Pol基因的DNA疫苗、重组禽痘病毒、重组痘苗病毒、重组腺病毒之间的不同配伍,对HIV疫苗的“prime-boost”免疫策略进行研究。结果表明:1) rFPV、rMVA、rAD5三种重组病毒单独免疫后引起的体液及细胞免疫反应强度依次增加。2)DNA prime/重组病毒boost免疫策略中,rAD5加强所引起的免疫反应远远超过另两种重组病毒。3)不同重组病毒的搭配中,rAD5 prime/... 

【文章页数】：113 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
第一章 前言
    第一部分 艾滋病疫苗的研究现状
        一、HIV 病毒概述
            1. HIV 流行情况
            2. HIV 病毒的分型
            3. HIV 的感染机制
            4. HIV 病毒的分子生物学
            5. HIV 病毒的复制周期
        二、HIV 疫苗可行性研究及构建策略与形式
            1. HIV 疫苗的可行性
            2. HIV 疫苗的构建策略
            3. HIV 疫苗的几种不同形式
    第二部分 Prime-boost 免疫策略及HIV疫苗临床情况
        一、prime-boost免疫策略概述
        二、HIV 疫苗临床情况
    第三部分 本论文的设计方案
第二章 材料和方法
    第一部分 HIV-1 抗原选择及 DNA 疫苗的构建
        一、目的基因的获得
        二、HIV-1 DNA 疫苗的构建、鉴定
        三、HIV-1 DNA 疫苗在真核细胞中的表达分析
    第二部分 rFPV 的构建及不同启动子的比较
        一、rFPV 的构建
        二、rFPV 抗原体外表达鉴定及比较
        三、两株rFPV体液及细胞免疫的比较
    第三部分 rMVA 的扩增、纯化及滴度测定
        一、rMVA 的扩增
        二、rMVA 的纯化
        三、rMVA 滴度的测定
        四、rMVA 抗原体外表达鉴定
    第四部分 rAD5 的扩增、纯化及滴度测定
        一、rAD5 的扩增
        二、rAD5 的纯化
        三、rAD5 的滴度测定
        四、rAD5 抗原体外表达鉴定
    第五部分 prime-boost 免疫策略的研究
        一、不同重组病毒单针免疫效果的比较
        二、DNA 疫苗初免不同形式重组病毒加强免疫效果的比较
        三、不同重组病毒间的配伍
        四、HIV 疫苗最佳免疫策略的研究
        五、rAD5/rMVA 策略中不同免疫间隔的比较
第三章 结果与讨论
    第一部分 DNA 疫苗的构建
        一、D-GP 质粒图谱说明
        二、载体酶切鉴定
        三、HIV gag-pol 插入片断序列测定
        四、DNA 疫苗抗原性分析
        五、小结
    第二部分 rFPV 的构建及不同启动子效率的比较
        一、穿梭质粒s-plw22 与s-psc11 的构建
        二、重组穿梭质粒的构建
        三、FPV与重组穿梭质粒的同源重组及rFPV的筛选
        四、rFPV 的滴度测定
        五、rFPV 插入序列的鉴定
        六、两株rFPV 抗原表达研究及比较
        七、两株rFPV 体液及细胞免疫的研究与比较
        八、小结
    第三部分 rMVA、rAD5 的扩增、纯化及滴度测定
        一、rMVA 的扩增、纯化及滴度测定
        二、rMVA 抗原性分析
        三、rAD5 的扩增、纯化及滴度测定
        四、rAD5 抗原性分析
    第四部分 prime-boost 免疫策略的研究
        一、不同重组病毒单针免疫效果的比较
        二、DNA 初免不同重组病毒加强免疫效果的比较
        三、不同剂量重组腺病毒免疫效果的比较
        四、不同重组病毒间的配伍
        五、最佳免疫策略的研究
        六、不同免疫间隔的研究
        七、小结
    第五部分 讨论
参考文献
致谢
中文摘要
英文摘要
作者简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]艾滋病研究进展[J]. 裘炯良,郑剑宁,赵玉婉.  检验检疫科学. 2003(01)
[2]艾滋病研究进展[J]. 胡国龄.  实用预防医学. 2000(03)



本文编号：3652613