携带人肾素基因及血管紧张素原基因的转基因小鼠的初步建立

发布时间：2022-07-12 14:46

　　原发性高血压是一种血压不明原因升高的多基因遗传病。已证明肾素、血管紧张素系统（RAS）与高血压的发生发展关系密切。为探讨原发性高血压的分子遗传机制，我们进行了携带人肾素基因及血管紧张素原基因转基因小鼠的初步研究。碱裂解法提取克隆人肾素基因及血管紧张素原基因的质粒，PEG8000纯化。限制性酶切图谱分析证实这两个基因的结构是完整的，符合转基因实验要求。玻璃粉洗脱法对上述基因进一步纯化。用微注射法将其导入小鼠受精卵的雄性原核。注射后成活的卵移植到假孕母鼠输卵管。共移植34只鼠，其中11只怀孕，产仔40只。提取鼠尾DNA作Southern杂交分析。结果表明4只鼠有人肾素基因整合，整合率为10％。血管紧张素原基因末检测到。取转基因阳性鼠肾脏提取总RNA，用人肾素cDNA作探针进行Northern杂交，结果显示，2只转基因阳性鼠肾脏有人肾素mRNA合成。本实验为建立携带人肾素基因及血管紧张素原基因的转基因高血压鼠奠定了基础。该工作仍在进行中。 

【文章页数】：87 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 文献综述
    一、转基因动物—高血压研究中的一个新动物模型
    二、转基因小鼠在心血管研究中的应用
第二部分 质粒phRNTM15及phANTM14的扩增、纯化及限制性内切酶图谱分析
    一、材料
    二、方法
    三、结果与分析
    四、讨论
    五、图版
第三部分 携带人肾素及血管紧张素原基因的转基因小鼠的初步建立
    一、材料
    二、方法
    三、结果与分析
    四、讨论
第四部分 结论
图版
参考文献
致谢



本文编号：3659320