小鼠FGF21基因克隆及his-mFGF21融合蛋白的诱导表达

发布时间：2022-08-06 16:40

　　目的:对小鼠FGF21基因进行克隆并诱导表达FGF21融合蛋白。方法:以带有小鼠FGF21的T载体pMD19-T-mFGF21为模板特异性扩增FGF21基因片段,将扩增产物克隆至pET-28a（+）,得到pET-28a（+）-mFGF21的重组子,并转化于大肠杆菌BL21（DE3）,使用IPTG诱导融合蛋白的表达,纯化后采用Western Blot进行鉴定。结果:pET-28（+）-mFGF21重组质粒构建成功,表达出可溶性的his-mFGF21融合蛋白,经纯化后该蛋白his-mFGF21可与FGF21抗体特异性结合。结论:成功构建pET-28（+）-mFGF21重组子,并表达出his-mFGF21蛋白。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠FGF21基因克隆及pET-28a (+) -mFGF21原核表达载体的构建
        1.2.2 融合蛋白his-mFGF21的原核表达
        1.2.3 融合蛋白his-mFGF21的纯化
        1.2.4 Western Blot检测
2 结果
    2.1 小鼠FGF21基因克隆及pET-28a (+) -mFGF21原核表达载体的构建
    2.2 融合蛋白his-mFGF21的原核表达
    2.3 融合蛋白his-mFGF21的纯化
    2.4 Western Blot检测
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]成纤维细胞生长因子21对小鼠肝纤维化的作用及其机制[J]. 王大秀,韩继武.  临床肝胆病杂志. 2018(06)
[2]成纤维细胞生长因子21心肌保护作用的研究进展[J]. 肖卫晋,李国华,屈顺林,任重,姜志胜.  中国动脉硬化杂志. 2017(05)
[3]FGF21生物学特征及对脂肪组织糖代谢的调节[J]. 吕欣,任毅,杨静.  中国现代医药杂志. 2017(01)
[4]2型糖尿病合并动脉粥样硬化的发病机制、临床诊断与治疗[J]. 石维.  中国老年学杂志. 2016(07)
[5]免疫系统与动脉粥样硬化发病机制的研究进展[J]. 刘丽,张腾,陈瑜.  中西医结合心脑血管病杂志. 2015(08)
[6]动脉粥样硬化发病的炎症机制的研究进展[J]. 刘俊田.  西安交通大学学报(医学版). 2015(02)
[7]成纤维细胞生长因子21对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变中内质网应激诱导的凋亡的影响[J]. 伍熙,赵东晖,范谦,程姝娟,张铭,彭红玉,柳景华.  中国动脉硬化杂志. 2014(04)
[8]FGF21与原发性高血压的相关性初探[J]. 唐青蓝,李红梅,王剑青,管亚慧,雷霆雯,许庆忠.  贵阳医学院学报. 2013(04)



本文编号：3669992