白介素33对乳鼠心肌细胞乏氧/复氧损伤时胞内活性氧自由基生成的影响
发布时间:2023-10-27 18:16
目的探讨白介素33(IL-33)对乳鼠心肌细胞乏氧/复氧损伤的保护作用及胞内活性氧自由基(ROS)生成的影响。方法分离培养SD乳鼠心肌细胞,将原代培养的心肌细胞随机分为单纯对照(C)组、加药对照(rIL-33 100 ng/ml,C1)组、乏氧/复氧(A/R)组、A/R+rIL-33(1、10、100ng/ml)组,乏氧培养3 h后,复氧2 h。免疫组化鉴定心肌细胞;MTT法检测细胞存活率;ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率;流式细胞仪检测细胞凋亡(AV-PI双标法)、胞内ROS生成量(ROS-DHE荧光探针)。结果与C组相比,A/R组心肌细胞存活率明显下降(P<0.01),LDH漏出显著增高(P<0.01),凋亡率及胞内ROS含量显著增加(P<0.01);与A/R组相比,IL-33治疗组剂量依赖性地提高细胞存活率(P<0.01),降低LDH漏出率、细胞凋亡率(P<0.01)及胞内ROS含量(P=0.03);加药对照组与C组相比,心肌细胞存活率、凋亡率、胞内ROS含量差异无统计学意义。结论 IL-33在心肌乏氧/复氧损伤过程中可以剂量依赖性地发...
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料和方法
1. 1 乳鼠心肌细胞培养
1. 2 心肌细胞乏氧/ 复氧模型的建立
1. 3 实验分组
1. 4 心肌细胞鉴定
1. 5 心肌细胞存活率测定
1. 6 心肌细胞乳酸脱氢酶( LDH) 漏出率检测
1. 7 流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率、胞内ROS含量
1. 8 统计学方法
2 结果
2. 1 乳鼠心肌细胞鉴定
2. 2 MTT法测定心肌细胞存活率
2. 3 心肌细胞LDH漏出水平
2. 4 流式细胞仪检测细胞凋亡
2. 5 细胞内ROS含量检测
3 讨论
本文编号:3857026
【文章页数】:5 页
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1 材料和方法
1. 1 乳鼠心肌细胞培养
1. 2 心肌细胞乏氧/ 复氧模型的建立
1. 3 实验分组
1. 4 心肌细胞鉴定
1. 5 心肌细胞存活率测定
1. 6 心肌细胞乳酸脱氢酶( LDH) 漏出率检测
1. 7 流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率、胞内ROS含量
1. 8 统计学方法
2 结果
2. 1 乳鼠心肌细胞鉴定
2. 2 MTT法测定心肌细胞存活率
2. 3 心肌细胞LDH漏出水平
2. 4 流式细胞仪检测细胞凋亡
2. 5 细胞内ROS含量检测
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本文编号:3857026
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