鉴定与衰老相关的甲基化基因及筛选具有逆调控效应的物质

发布时间：2023-11-02 19:10

　　目的筛选和验证与人体衰老进程相关的甲基化基因,建立方便、灵敏、准确的检测方法,筛选能够逆向调控与衰老过程相关的甲基化基因的物质。方法通过GEO(Gene Expression Omnibus)公共数据库筛选并验证与人体衰老进程相关的甲基化基因,建立甲基化qPCR检测体系,验证目标基因与人体衰老的相关性。使用一组具有抗衰老功效的天然提取物/物质处理体外培养的细胞系,检测细胞系表型变化及目标基因甲基化水平变化。结果建立了促泌素(secretagogin,SCGN)和整合素亚基α2b(integrin subunit alpha 2b,ITGA2B)基因的甲基化检测体系,在53例独立样本中验证了SCGN和ITGA2B基因的甲基化调控与人体衰老进程相关。表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和没食子酸(gallic acid,GA)抑制体外培养的细胞系的存活能力,且能逆转SCGN和ITGA2B基因在衰老进程中发生的甲基化调控。结论 SCGN和ITGA2B基因甲基化水平的变化有可能用于评估人体衰老状态和监测人体衰老进程,同时也为开发基于DNA甲基化...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 外周血样本
        1.1.2 细胞
        1.1.3 文献数据库
    1.2 主要试剂与仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 筛选和验证与衰老进程相关的甲基化基因
        1.3.2 建立和验证与衰老进程相关的甲基化基因的qPCR检测方法
        1.3.3 DNA甲基化位点的选定及其对应引物、探针的合成
        1.3.4 DNA甲基化阴阳性对照实验及实时定量PCR及其结果判定
        1.3.5 细胞培养
        1.3.6 细胞存活实验
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 甲基化基因特异位点的筛选及验证
    2.2 甲基化阴阳性对照体系的选择
    2.3 SCGN的甲基化和ITGA2B的去甲基化水平均与年龄呈线性关系
    2.4 EGCG和GA抑制肿瘤细胞存活
    2.5 EGCG和GA逆转细胞中的SCGN的甲基化和ITGA2B的去甲基化水平
3 讨论



本文编号：3859590