脐血造血干/祖细胞体外扩增及无血清培养的实验研究

发布时间：2024-02-26 20:07

　　目的:作为造血干细胞的新来源,脐血以其独特的优势已广泛应用于移植治疗、生物免疫治疗、基因治疗等领域。但由于单份脐血的采集量低,不足以满足成人移植的需要,长期以来,研究者们一直在探索脐血干/祖细胞的有效分离、扩增的方法。本课题旨在寻求一种简便、高效、实用的脐血干/祖细胞的分离方法,并且对分离后的细胞进行体外扩增,来考察分离后的脐血干/祖细胞的增殖能力,探索扩增后最佳的应用时机;同时,比较有血清与无血清方法体外扩增脐血干/祖细胞的异同,探究无血清方法临床应用的可能性。 方法:体外分离并培养脐血单个核细胞(MNC),计数MNC总数、流式细胞仪检测CD34+细胞含量、混合集落生成单位(CFU-mix)培养观察集落形成能力,验证脐血干/祖细胞分离和扩增的效果。 1.将自行配制的比重为1.064g/L的蔗聚糖-泛影葡胺(Ficoll-hypaque)分离液与传统的比重为1.077g/L淋巴细胞分离液密度梯度分离脐血,检测上述指标,比较分离效果;2.用上述两种分离液分离的脐血MNC进行添加细胞因子(IL-3、SCF、GM-CSF)的为期三周的体外扩增,并对扩增后的细胞进行上述指标的检测,观察每周脐血...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1：1.064组新鲜脐血CFU-mix（×200）

图2：1.077组新鲜脐血CFU-mix（×200）

图3：1.064组扩增7天时CFU-mix（×200）

图4：1.064组扩增14天时CFU-mix（×200）

本文编号：3911790