C1q/TNF相关蛋白3减轻氧化应激诱导的间充质干细胞衰老

发布时间：2024-11-02 13:51

　　 目的建立间充质干细胞（MSCs）衰老模型,探讨C1q/TNF相关蛋白3（CTRP3）对衰老MSCs的作用并初步探讨机制。方法用过氧化氢（H₂O₂）诱导小鼠MSCs衰老,CCK8实验和β-半乳糖苷酶染色验证模型的建立。外源性给予CTRP3处理MSCs 24 h,CCK8实验检测增殖活性,β-半乳糖苷酶染色检测MSCs衰老,分化诱导实验检测MSCs分化能力,Western blotting法检测MSCs凋亡。RT-PCR检测MSCs中衰老相关基因P16、P21以及抗衰老基因SIRT1的mRNA表达变化。采用GraphPad Prism 6进行统计分析。组间比较采用方差分析或LSD两两比较。结果 H₂O₂可抑制MSCs的增殖活性,且呈浓度依赖性。与正常对照组相比,200μmol/L H₂O₂作用4 h,细胞立体感消失,细胞形态不规则;CCK8染色结果显示细胞增殖活性显著下降;β-半乳糖苷酶阳性细胞百分比显著升高。继续CTRP3处理24 h后,衰老MSCs增殖和分...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 MSCs的培养
    1.2 CTRP3蛋白的制备
    1.3 MSCs衰老模型的建立
    1.4 CCK8测细胞活性
    1.5 细胞β-半乳糖苷酶染色
    1.6 MSCs成脂成骨诱导分化实验
    1.7 Western blotting分析细胞蛋白表达水平
    1.8 RNA提取和RT-PCR
    1.9 统计学处理
2 结 果
    2.1 H2O2呈浓度依赖性地抑制MSCs增殖活性
    2.2 成功建立衰老模型
    2.3 CTRP3抑制MSCs的衰老
    2.4 CTRP3增强衰老MSCs的分化潜能
    2.5 CTRP3抑制衰老MSCs凋亡
    2.6 CTRP3下调P16和P21表达, 上调SIRT1的 表达
3 讨 论



本文编号：4009606