细胞间粘附分子1特异性靶向结合肽的筛选及其生物学功能研究

发布时间：2025-01-14 07:42

　　目的：利用噬菌体展示随机十五肽库筛选技术，获得与人细胞间粘附分子1(ICAM-1)特异性靶向结合的小肽，并明确其生物学功能，为进一步研究肽导向药物提供基础。方法：采用固相包被分子和冰冻病理组织切片两种方法对噬菌体展示随机肽库进行亲和淘选，利用ELISA法筛选出能与人ICAM-1特异结合并具有高度亲和力的阳性噬菌体单克隆，提取其质粒DNA进行测序，分析阳性序列的特点。利用ELISA法和蛋白质空间结构模拟技术从阳性噬菌体单克隆中选取出与人ICAM-1亲和力最高的单克隆作为目的肽序列所在的噬菌体单克隆，计算目的噬菌体单克隆与ICAM-1的亲和常数，进一步推论目的肽的氨基酸序列，并在体外合成、纯化及标记目的肽进行体外和动物体内研究。采用ELISA法检验合成目的肽与人ICAM-1的结合性能并行拮抗实验；利用免疫组织化学的方法比较合成目的肽、ICAM-1的单克隆抗体在炎症组织中结合部位。将等剂量的合成目的肽和对照无关19肽注射入单侧输尿管结扎(UUO)的动物模型体内，观察两种小肽在动物模型双侧肾脏的分布。结果：采用两种方法分别经过4-5轮的亲和淘选，经ELISA筛选并测序后得到6个与ICAM-1高亲...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1ELISA比较6种噬菌体单克隆与ICAM一1的亲和力经EL工SA方法反复比较，认定与ICAM一1结合的亲和力最高的噬菌体展示单克隆为14#

助87士57体展达可一10·29l/mol，#不能列与定。

图3.3.1手术组注射FITC一日的肚后的梗阻侧肾脏

图3.3.2手术组注射FITC一无关肤后的梗阻侧肾脏UUO模型为经典急性肾小管间质炎症模型，术后3d时肾小管间质中

图3.3.2手术组注射FITC一无关肤后的梗阻侧肾脏UO模型为经典急性肾小管间质炎症模型，术后3d时肾小

本文编号：4026626