木香烃内酯通过抑制NLRP3缓解LPS诱导小鼠巨噬细胞的炎症反应

发布时间：2025-02-08 11:30

　　 目的:探讨木香烃内酯(Cos)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠原代巨噬细胞炎性小体激活和炎症反应的影响。方法:提取并培养小鼠腹腔原代巨噬细胞,用不同浓度Cos预处理巨噬细胞1 h后,1 mg/L LPS处理,分为空白对照组、模型组(单用LPS)、不同浓度(5、10和20μmol/L) Cos+LPS组; ELISA法检测培养液上清中TNF-α/IL-6的含量,q PCR法检测TNF-α/IL-6 mRNA表达;为明确Cos对LPS诱发的炎症反应的保护机制,增加NLRP3抑制剂MCC950组(10μmol/L),LPS刺激4h、6 h,Western blot检测NLRP3、ERK及IκB的激活,细胞免疫荧光实验观察NLRP3的蛋白水平。结果:与LPS组比较,LPS+Cos组TNF-α/IL-6的mRNA表达及细胞培养液上清TNF-α/IL-6分泌均显著降低(P <0. 05); Western blot和细胞免疫荧光实验结果表明,与LPS组比较,LPS+Cos组的NLRP3蛋白水平显著降低,其抑制效果与NLRP3抑制剂MCC950相当(P <0. 05); Western bl...

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【文章目录】：
1 材料与仪器
    1.1 材料
        1.1.1 细胞
        1.1.2 药物与试剂
        1.1.3 主要仪器
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养及分组处理
        1.2.2 RNA的提取与实时荧光定量PCR检测细胞炎症因子
        1.2.3 Western blot检测细胞ERK、IκB和NLRP3的表达与激活
        1.2.4 ELISA测细胞培养上清中炎症因子的含量
        1.2.5 免疫荧光染色法观察细胞内NLRP3的表达
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 Cos对LPS诱导的巨噬细胞炎症因子mRNA表达的影响
    2.2 Cos对LPS诱导的巨噬细胞炎症因子分泌的影响
    2.3 Cos缓解LPS诱导的巨噬细胞炎性小体
    2.4 Cos缓解LPS诱导的ERK、IκB在巨噬细胞中的激活
3 讨论



本文编号：4031456