EZH2在衰老细胞中表达下调引起Netrin-1表达增加进而促进交感神经轴突生长

发布时间：2025-04-01 04:36

　　 交感神经在一些疾病动物模型和老年小鼠模型组织中呈现发芽生长和密度增加的趋势。这提示,交感神经与衰老密切相关。本研究采用免疫组织化学检测老年小鼠肝、肺、脾组织和人结肠腺瘤组织衰老模型中交感神经标记蛋白酪氨酸羟化酶(TH)的表达情况。结果证实,衰老组织中的交感神经密度显著增加。然而,目前对衰老组织的这种生物学改变机制尚不明确。本研究以人成纤维细胞系2BS为实验材料,经转录组测序发现,分泌性轴突导向因子导蛋白-1在衰老细胞中上调表达。ELISA和实时定量PCR结果显示,在博来霉素、离子射线、癌蛋白RasV12过表达所诱导的早衰及复制性衰老的2BS细胞中,导蛋白-1的蛋白质和mRNA表达量均比年轻对照组高。DNA损伤反应(DNA damage response,DDR)是调控衰老细胞分泌蛋白质表达的重要途径。为明确导蛋白-1在衰老细胞的上调表达是否与DDR相关,使用小分子化合物抑制DDR的重要效应分子ATM(ataxia telangiectasia mutated)和CHK2(checkpoint kinase 2)在博来霉素诱导的衰老2BS细胞中的活性。ELISA和实时定量PCR结果显示,...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养及衰老细胞的诱导
    1.3 细胞总RNA的提取及q PCR检测
    1.4 ELISA检测衰老细胞中导蛋白-1蛋白水平的表达
    1.5 免疫组织化学检测交感神经纤维 (TH+) 和衰老组织标记物
    1.6 细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶 (SA-β-gal) 染色
    1.7 Western印迹检测衰老细胞中EZH2蛋白含量
    1.8 CHIP和CHIP-qPCR
    1.9 大鼠DRG神经元分离培养及共培养
    1.1 0 统计学方法
2 结果
    2.1 人结肠腺瘤及老年鼠组织中交感神经支配密度增加
    2.2 轴突导向通路在衰老细胞与年轻细胞差异表达基因集中富集显著
    2.3 轴突生长导向因子导蛋白-1在衰老细胞中上调表达
    2.4 导蛋白-1在衰老细胞中的分泌不依赖于DDR途径
    2.5 导蛋白-1在衰老细胞中表达增加与EZH2表达下调相关
    2.6 衰老细胞通过分泌导蛋白-1调控神经轴突生长
3 讨论



本文编号：4038928