人肺炎球菌参考血清09CS的制备及其中13个肺炎球菌结合疫苗血清型抗体的IgG含量和调理吞噬滴度

发布时间：2017-06-13 06:03

  本文关键词：人肺炎球菌参考血清09CS的制备及其中13个肺炎球菌结合疫苗血清型抗体的IgG含量和调理吞噬滴度，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的制备人肺炎球菌参考血清,对其中13价肺炎球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine,PCV)血清型(1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F型)的抗荚膜多糖抗体Ig G含量和调理吞噬滴度进行定值。方法用23价肺炎荚膜多糖疫苗免疫20名健康成人,采集免疫后血浆,进行混合、去纤维蛋白原、过滤、分装、冻干,制备人肺炎球菌参考血清09CS。在WHO细菌性呼吸道病原参考实验室(University of Alabama at Birmingham,UAB)和兰州生物制品研究所有限责任公司(Lanzhou Institute of Biological Products,LIBP)实验室,采用WHO推荐的Pn PS ELISA法,以国际标准血清89SF为标准,对其中13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体Ig G含量定值;以临时定值的09CS为标准,检测12份WHO校正血清、16份LIBP质控血清和89SF,对定值的准确性进一步验证。同时以调理吞噬杀菌试验(opsonophagocytic killing assay,OPA)测定针对13个血清型的调理吞噬滴度。结果制备了5 000支(0.5 ml/支)冻干人肺炎球菌参考血清09CS,残留水分含量2.3%。确定了09CS中13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体Ig G含量的临时定值;以09CS为标准检测的12份WHO校正血清和16份LIBP质控血清的13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体结果,与以89SF为标准检测的结果,均具有良好的直线相关关系(r≈1.00,P0.05);以09CS为标准检测的89SF的13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体的新值与其原定值比较,各血清型的误差百分率的绝对值均20%。确立了09CS中13价PCV血清型调理吞噬滴度。结论 LIBP成功制备了人肺炎球菌参考血清09CS,完成了对其中的13价PCV血清型抗荚膜多糖抗体Ig G含量的准确定值,并确定了调理吞噬滴度。
【作者单位】： 兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心;中国食品药品检定研究院;美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理学系呼吸道病原参考实验室;中国生物技术股份有限公司;
【关键词】： 肺炎球菌 参考血清 免疫球蛋白G 酶联免疫吸附试验 调理吞噬杀菌试验
【基金】：国家科技支撑计划课题2008BAI66B01 国家科技部“重大新药创制”科技重大专项课题之国药集团技术创新产学研联盟子课题13基金项目:价肺炎球菌结合疫苗临床前研究(2011ZX09401-403) 十二五国家高技术发展研究计划(863计划)疫苗研发关键技术及产品研发项基金项目:目(2012AA02 A 401) 2012年甘肃省战略性新兴产业专项项目,甘发改高技[2012]672号
【分类号】：R392
【正文快照】： 肺炎链球菌有90多个血清型,约30个血清型对人有致病性[1],可引起肺炎、脑膜炎、急性中耳炎等多种疾病。接种疫苗是预防和控制该菌引起疾病的有效措施。考虑到肺炎链球菌菌型分布的复杂性,WHO建议肺炎球菌结合疫苗的临床评价应以型别特异性抗体水平作为第一临床终点的判断指标

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