大鼠脑星形胶质细胞体外培养方法的改进及鉴定

发布时间：2017-06-13 23:06

  本文关键词：大鼠脑星形胶质细胞体外培养方法的改进及鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探索大鼠脑星形胶质细胞(astrocytes,AS)的分离、培养及对原代培养的AS进行纯化的方法并进行改进,提高AS纯度,为研究AS的生物学作用提供模型。方法取新生1~3 d的SD大鼠大脑,冰板上去除嗅球及海马,仔细剥离软脑膜,吸管反复轻柔吹打制备成细胞悬液,差速贴壁去除成纤维细胞,原代培养7~12 d,待细胞相互融合并铺满培养瓶底部后,3次消化传代,胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)进行免疫荧光鉴定。比较方法改进前后AS纯度的变化。结果采用本实验改进的方法所分离培养出的AS纯度可达95%以上,方法改进后较改进前所培养的AS细胞GFAP免疫荧光阳性率(即AS细胞纯度)显著提高(P0.05)。结论经改进后的AS培养方法能够获取高纯度的AS,用于建立AS体外模型及研究体系。
【作者单位】： 哈尔滨医科大学附属第二医院麻醉科 黑龙江省麻醉与危重病研究重点实验室 黑龙江省高校麻醉基础理论与应用研究重点实验室;
【关键词】： 星形胶质细胞 原代培养 纯化 鉴定
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81171076)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 胶质细胞占成年哺乳动物脑细胞的半数以上,并且为神经元提供结构及物质支持[1],而星形胶质细胞(astrocyte,AS)是其中的主要部分,约占大脑容积的25%~50%。明确胶质细胞,尤其是星形胶质细胞,是修复和促进神经元生长[2]的关键,同时为中枢神经系统疾病的治疗提供了依据。AS分布广,

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