IFN-γ增强脂肪干细胞介导的免疫抑制机制

发布时间：2017-06-16 01:04

  本文关键词：IFN-γ增强脂肪干细胞介导的免疫抑制机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：脂肪源性干细胞(Adipose -derived stem cells, ADSCs)可以向成骨细胞和软骨细胞、平滑肌细胞、心肌细胞和神经细胞等分化。脂肪干细胞由于具备易于获取等特点,在组织工程中比骨髓间充质干细胞具有更加广阔的应用前景,并因此成为当今的研究热点之一。脂肪源性干细胞与间充质干细胞不但具有非常近似的生物学性质,而且在细胞表面标志谱的表达方面也十分接近。观察脂肪干细胞的生长规律,鉴定其干细胞特性和免疫学性质。探索脂肪源性干细胞表面白细胞抗原Ⅱ类分子的表达以及其免疫原性和免疫调节作用,并探讨其具体机制是通过什么途径诱导的。方法：分离培养脂肪源性干细胞,并用γ型干扰素刺激,然后用流式细胞术检测其表面免疫分子白细胞抗原Ⅱ的表达,实时荧光定量PCR和Western bolt分别检测吲哚胺-2,3-双加氧酶基因(Indoleamine 2,3-dioxygenase, IDO)和蛋白的表达。脂肪源性干细胞单向刺激淋巴细胞,观察细胞增殖情况。淋巴细胞用植物血凝素(phytohaemagglutinin, PHA)刺激后,加入1×102-1×105脂肪源性干细胞,观察淋巴细胞增殖情况：同时,1×102-1×105脂肪源性干细胞作为“第三者”细胞加入混合双向淋巴细胞反应体系中,同样观察淋巴细胞增殖情况。结果：所获脂肪干细胞具有很强的体外增殖能力,其生长曲线呈“S”形；第3代脂肪干细胞表面CD29、CD44、 CD90以及主要组织相容性抗原Ⅰ呈阳性表达,CD31、CD45、CD34及主要组织相容性抗原Ⅱ呈阴性表达；未发现异体脂肪干细胞刺激淋巴细胞增殖。脂肪干细胞低表达白细胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2,3-双加氧酶,但在γ型干扰素IFN-γ刺激后,白细胞抗原Ⅱ和吲哚胺-2,3-双加氧酶表达均明显上调。脂肪源性干细胞不能刺激淋巴细胞增殖,但能抑制植物血凝素或异体淋巴细胞导致的淋巴细胞增殖,且脂肪源性干细胞与混合淋巴细胞共培养的上清中检测到大量Y型干扰素的表达。结论：提示所获得细胞为脂肪干细胞,且具有较弱的排斥反应,有可能成为细胞治疗或组织工程的同种异体细胞来源；提示脂肪干细胞具有低免疫原性,同时可在体外抑制淋巴细胞增殖反应,添加外源性γ型干扰素有助于脂肪源性干细胞发挥免疫抑制作用。
【关键词】：脂肪干细胞 免疫抑制 混合淋巴细胞反应 γ型干扰素(IFN-γ)
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2

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本文编号：453950