H7N9亚型禽流感病毒核蛋白NP原核表达载体的构建与表达

发布时间：2017-06-19 16:10

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【摘要】：目的构建甲型H7N9禽流感病毒NP基因的原核表达载体,并表达其编码重组蛋白。方法 RT-PCR法扩增H7N9病毒NP基因,克隆至原核表达载体PET28a(+)中,构建表达载体PET28a(+)-NP质粒;经PCR、双酶切、测序鉴定后,将PET28a(+)-NP质粒转化表达菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达NP重组蛋白。应用western blot法鉴定NP蛋白的表达。结果成功构建NP基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达出分子量为56kD的NP重组蛋白。结论实现了禽流感病毒H7N9NP重组蛋白在原核系统中的高效表达,为禽流感诊断试剂及单抗的研发工作奠定了基础。
【作者单位】： 江苏省疾病预防控制中心;
【关键词】： HN亚型禽流感病毒 核蛋白NP 原核表达
【基金】：国家科技重大专项(2012ZX10004-210-004)
【分类号】：R373
【正文快照】： 2013年3月上海、浙江、安徽相继发现人感染甲型H7N9亚型禽流感病毒,这是全球首次发现的新亚型高致病性禽流感病毒,病例主要分布于北京、上海、江苏、浙江、安徽、山东、河南、台湾、福建等地[1]。流感病毒亚型众多,但其核蛋白(NP)相对保守,具有型和种的特异性,是流感病毒分型

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本文编号：463039