c-Myc对诱导性多能干细胞的诱导效率及全能性影响的研究

发布时间：2017-06-23 01:03

  本文关键词：c-Myc对诱导性多能干细胞的诱导效率及全能性影响的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：该研究探讨转录因子c-Myc对多能诱导干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)诱导效率及形成的iPS克隆全能性的影响。将Yamanaka四因子(Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc,OSKM)和不含c-Myc的三因子(OSK)病毒分别感染OG2小鼠成纤维细胞(mouse embryo fi broblast,MEF),诱导成为iPS细胞,通过计数iPS克隆形成数目和流式细胞仪分析iPS克隆的绿色荧光蛋白(GFP)阳性比例,比较OSKM和OSK诱导iPS的效率。分别挑取三株OSK和OSKM诱导的iPS克隆,采用荧光定量PCR法、碱性磷酸酶(AP)染色法和免疫荧光法检测iPS克隆的干性相关蛋白的表达;采用畸胎瘤实验、嵌合体形成实验和四倍体补偿实验检测iPS克隆的全能性。结果显示:在该实验室诱导体系里,OSK病毒感染MEF后形成的iPS克隆数目明显增多,GFP阳性克隆的比例增加。OSK和OSKM诱导iPS克隆的干细胞基本特征,包括形态、AP染色、干细胞特异性基因表达、三胚层形成均没有明显差异。然而,OSK诱导iPS克隆在形成嵌合体小鼠的全能性评估实验中的阳性比例高于OSKM克隆,且只有OSK克隆株能够获得生殖系传递小鼠和四倍体补偿小鼠。该研究表明,在实验诱导体系里去除c-Myc的三因子OSK诱导iPS的效率显著高于OSKM四因子,且三因子诱导iPS克隆具有更好的全能性。
【作者单位】： 上海市信号转导与疾病研究重点实验室 同济大学生命科学与技术学院;
【关键词】： 诱导多能干细胞 c-Myc 嵌合体小鼠 四倍体补偿小鼠
【基金】：国家自然科学基金(批准号:31071227)资助的课题~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS cells)和胚胎干细胞同样具有无限增殖和自我更新的能力,但iPS细胞避免了胚胎干细胞存在的伦理等诸多问题,因此是再生医学研究的重大突破。自2006年Yamanaka小组[1]通过共表达Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四种转录因子(OSKM)成

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