肠出血性大肠杆菌O157∶H7变种Q蛋白对志贺毒素表达的影响

发布时间：2017-06-28 04:13

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【摘要】：1株肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7变种EC169菌株,携带stx基因但不表达志贺毒素。通过高效热不对称交错聚合酶链式反应(high-efficiency thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction,hiTAIL-PCR)hiTAILPCR扩增得到EC169 stx1及其上游核苷酸片段并克隆测序,结果表明:EC169 q基因与标准株sakai q基因相比存在6个SNP位点。通过PCR扩增O157∶H7高毒株EC150 q基因全长,并构建表达载体pkk223-q分别转化EC169和低毒株EC157。反转录荧光定量PCR实验结果表明,外源q基因在EC169和EC157重组菌中可高效表达,并引起EC157stx转录水平上调,但EC169重组菌stx转录水平不变。反向乳胶凝集实验结果亦证实EC157重组菌志贺毒素表达量提高,而EC169重组菌志贺毒素表达量不变。Q蛋白变异可能并非EC169志贺毒素不表达的主要原因。
【作者单位】： 武汉轻工大学生物与制药工程学院;河南医药技师学院制药工程系;武汉轻工大学食品科学与工程学院;
【关键词】： 大肠杆菌O∶H Q蛋白 反转录荧光定量PCR 志贺毒素 hiTAIL-PCR
【基金】：国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA101703-3) 教育部留学回国人员科研启动基金项目(教外司留20111139) 湖北省教育厅优秀中青年人才计划项目(Q20111710) 武汉市科技局国际科技合作计划项目(2013030409020113)
【分类号】：R378.2
【正文快照】： 肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一类十分重要的食源性致病菌,感染人体后会出现腹痛、腹泻、恶心或呕吐,部分患者还会有发热症状出现。可引起胃肠道以及全身性的疾病,如出血性肠炎和溶血性尿毒综合征,临床表现为溶血性贫血、急性肾衰竭、凝血功能障碍、血小板减少等[1-2]。感染严

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