树突状细胞外泌体诱导间充质干细胞向成骨细胞分化
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【摘要】:本研究观察人树突状细胞(dendritic cells,DC)来源的外泌体(DC-derived exosome,DCex)对人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)成骨分化的影响。采用超速离心法从树突状细胞培养上清中获取DCex,应用电子显微镜观察DCex形态并通过流式细胞术检测和鉴定其细胞来源。取第3代MSC,设3组培养诱导体系:①对照组:α-MEM基础培养液组;②实验组:α-MEM基础培养液+DCex(10μg/ml)组;③α-MEM基础培养液+标准诱导剂组。采用荧光实时定量PCR、琼脂糖凝胶电泳检测各组成骨分化转录因子Runx2 mRNA的表达情况,并进行碱性磷酸酶(ALP)活性检测。另外,荧光染料DiI标记DCex,应用共聚焦显微镜观察DCex进入MSC的过程。结果显示,在电子显微镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构,直径为40-100 nm,并表达DC细胞的标志物CD83,CD86,CD80和HLA-DR。在DCex处理MSC后6 h时,可在共聚焦显微镜下观察到进入到MSC胞质内的DCex,随着作用时间延长,细胞荧光强度增加。按组培养第7天,DCex实验组Runx2表达较对照组增高,差异有统计学显著性(P0.05);MSC培养第14天,DCex组ALP含量OD值与对应蛋白比为2.22±0.27,显著高于阴性对照组(1.20±0.21)(P0.01),但低于标准诱导组(3.22±0.24)(P0.05)。结论:DCex可以促进MSC向成骨细胞分化,其具体机制仍需进一步研究证实。
【作者单位】: 河北北方学院;空军总医院血液科;
【关键词】: 树突状细胞 外泌体 间充质干细胞 成骨分化
【分类号】:R329.28
【正文快照】: 目前,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)被认为是具有分化为成骨细胞、成软骨细胞和成脂肪细胞潜能的成体干细胞。MSC的特殊性还在于其拥有的免疫调节能力。研究证实,MSC可以调节多种免疫细胞功能,涉及的对象包括T细胞、NK细胞、树突状细胞(dendritic cells,DC)等,其
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