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过氧化氢诱导原代大鼠睾丸间质细胞氧化损伤模型的建立

发布时间:2017-07-02 04:02

  本文关键词:过氧化氢诱导原代大鼠睾丸间质细胞氧化损伤模型的建立,,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:为了建立体外模拟氧自由基诱导的细胞氧化损伤模型,本试验采用Percoll密度梯度离心法纯化原代大鼠Leydig细胞,并鉴定特异性蛋白3β-HSD;采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位、ROS以及O·-2含量,比色法测定·OH、MDA的含量以及抗氧化物酶SOD、CAT和POD的活性。结果显示:特异性蛋白3β-HSD鉴定后,荧光显微镜观察到大部分细胞呈现特异性荧光。MTT测定结果显示,300~1 000μmol·L-1H2O2处理细胞均可极显著降低细胞活力(P0.01);300μmol·L-1H2O2处理可显著提高Leydig的凋亡率以及增加ROS含量(P0.05)和·OH含量(P0.01),但可显著降低线粒体膜电位(P0.05)。H2O2处理对Leydig细胞内SOD、CAT和POD的活性无显著影响(P0.05),但可显著提高细胞内MDA的含量(P0.05)。结论:300μmol·L-1H2O2处理Leydig细胞8 h可以诱导细胞氧化损伤从而建立体外模拟氧自由基诱导细胞氧化损伤模型。
【作者单位】: 南京农业大学动物医学院/农业部动物生理生化重点开放实验室;
【关键词】HO 睾丸间质细胞 氧化损伤
【基金】:江苏省自然科学基金项目(BK2011647) 中央高校科研基本业务费(KYZ201151)
【分类号】:R-332
【正文快照】: 衰老是动物机体在生命过程中形态、结构和功能逐渐衰退的综合现象。近年来对衰老的病因及机制研究表明,在细胞和组织中不断进行的氧自由基反应可能是衰老的主要原因[1]。活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)是一种在机体内普遍存在的含氧活性分子。正常情况下,ROS在体内与机

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 方雅秀;陈晓春;;线粒体氧自由基与衰老的关系[J];国外医学(老年医学分册);2006年01期

2 王振云;周璇;李惠侠;廖旭东;崔群维;李莲;王根林;;茶多酚对氧化应激所致奶牛乳腺上皮细胞损伤的保护作用[J];南京农业大学学报;2012年03期

3 应锋;龚f3;孙佳音;沈洁;韩晓冬;;大鼠睾丸间质细胞的原代培养、鉴定与功能监测[J];中华男科学杂志;2008年01期

4 程义权;郭振河;杨家辉;余伦红;;过氧化氢对体外关节软骨细胞损伤效应及丹参干预作用实验研究[J];西南国防医药;2008年02期

5 杨建英;张勇法;乔晓岚;;睾丸间质细胞的研究进展[J];医学综述;2009年14期

6 孙亚捷;李新芳;;南沙参多糖对小鼠的抗衰老及清除氧自由基作用研究[J];中国药师;2005年09期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 孔靖;;清除氧自由基药物的研究进展[J];包头医学;2009年03期

2 郑亚凤;王琦;黄志伟;郑金贵;;灰树花多糖延缓果蝇衰老作用[J];福建农林大学学报(自然科学版);2010年06期

3 源瀚祺;黄庆华;李娆玲;;通过细胞模型体外评价抗氧化活性实验方法研究综述[J];广东药学院学报;2012年02期

4 郑菁;张志刚;孙应彪;苏莉;夏胡;李成云;张瑞;李晋;;硫酸镍对体外培养大鼠睾丸间质细胞超微结构的影响[J];工业卫生与职业病;2012年01期

5 宋庆亮;郭银;周蕾;赵秀军;牛嗣云;;何首乌饮对Leydig细胞衰老模型β-半乳糖苷酶表达的影响[J];承德医学院学报;2013年02期

6 张涛;马艳杰;王晓琴;;沙参属植物化学成分与药理作用研究进展[J];北方药学;2013年06期

7 王福海;黄成华;;活性氧自由基的研究进展[J];广州化工;2013年16期

8 陶晓倩;王大勇;柳海燕;林钗英;韩雪峰;时姗姗;崔英霞;戈一峰;姚兵;;膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响[J];医学研究生学报;2010年04期

9 王志军;魏晓东;孙洁;欧芹;;菟丝子醇提液对衰老模型小鼠肝线粒体氧化损伤和复合体酶活性的影响[J];黑龙江医药科学;2008年05期

10 李红宁;;六盘水桔梗科药用植物资源研究[J];六盘水师范高等专科学校学报;2009年06期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 段小群;玉郎伞多糖(YLS)抗肝纤维化作用及机制的研究[D];广西医科大学;2006年

2 曹军;姜黄素生物学作用的细胞与分子机制研究[D];大连医科大学;2006年

3 樊黎生;黑木耳多糖AAP-Ⅱa级分的制备及其生物活性的研究[D];华中农业大学;2006年

4 刘军;雌激素与骨性关节炎发病机制关系的研究[D];吉林大学;2009年

5 林家禾;白藜芦醇对大鼠肝纤维化的防治及相关机制的研究[D];广州中医药大学;2009年

6 段瑞生;紫杉烷化合物的抗氧化应激作用及其机制研究[D];河北医科大学;2010年

7 郭岚;《内经》长寿理论与培元固本治法延缓衰老作用的研究[D];湖北中医药大学;2013年

8 齐晓龙;共轭亚油酸对产蛋鸡抗氧化机能的影响[D];中国农业科学院;2013年

9 黄云飞;吸烟对雄性大鼠生殖毒性的实验研究[D];新疆医科大学;2013年

10 杨春;外源性脂肪源干细胞移植改善D-半乳糖致衰老大鼠性能力的研究[D];南方医科大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 姚伟丽;抗衰汤对血瘀证大鼠线粒体DNA(mtDNA)的影响[D];浙江中医药大学;2010年

2 张斌;氟诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡及机制研究[D];山西医科大学;2011年

3 祝红梅;FoxO1在氧化应激诱导糖异生/胰岛素抵抗机制中的作用[D];泸州医学院;2011年

4 吴艳;hnRNP A2/B1在脑缺血再灌注损伤中的表达研究[D];安徽医科大学;2011年

5 何华;男(雄)性雄激素缺乏与肥胖、脂类代谢基因之间关系的研究[D];复旦大学;2011年

6 赵婧;南沙参药材质量标准研究[D];山东中医药大学;2011年

7 陈思;茶枝柑皮多糖提取、分离纯化、结构及抗氧化活性研究[D];广东药学院;2011年

8 朱勇;微生物源性抗氧化剂对动物机体自由基代谢、肝脏损伤修复及生产性能的影响[D];上海交通大学;2007年

9 王红梅;线粒体呼吸代谢相关酶对桃果实成熟衰老及采后软化的影响[D];扬州大学;2007年

10 孙晓慧;灌胃绞股蓝提取液对自然衰老小鼠皮肤组织中H_2O_2含量、GSH-PX活性影响的实验研究[D];辽宁中医药大学;2007年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 唐美仪,张崇理;促肾上腺皮质激素释放激素对生殖功能的调节作用[J];动物学报;1998年04期

2 李凤新;孙振国;李辛;王金霞;王巍巍;朱彬;郜欣;孙非;;虎杖蒽醌化合物对阿霉素性心肌损伤的保护作用及机制[J];东北师大学报(自然科学版);2008年04期

3 梁培禾,靳风烁,贾思远,周紫垣;单细胞凝胶电泳技术操作[J];第三军医大学学报;2001年01期

4 郑延松,李源,张珊红,龚卫琴,孙斌;用低浓度过氧化氢建立心肌细胞氧化损伤模型[J];第四军医大学学报;2001年20期

5 ;Antioxidant Effect of Human Selenium-containing Single-chain Fv in Rat Cardiac Myocytes[J];Chemical Research in Chinese Universities;2009年02期

6 成钢;;哺乳动物睾丸间质细胞的分离及体外培养[J];中国畜牧兽医;2006年09期

7 王鲜忠,吴建云,孙燕,潘红梅,张家骅;培养的睾丸间质细胞对hCG刺激的反应性[J];核农学报;2005年04期

8 王璇;黄波;龙颖;李东阳;;锌对人肝癌细胞氧化应激水平的影响[J];南华大学学报(医学版);2007年03期

9 孙强;柴家科;姜恩魁;尹会男;梁黎明;蔺静;;TNF-α对大鼠Leydig细胞的作用及机制研究[J];解放军医学杂志;2008年01期

10 王晓云,张健,李健,段相林;睾丸间质细胞分泌功能调节因素的研究进展[J];解剖科学进展;2002年03期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 米娜;杨陟华;潘秀颉;曹珍山;陈忠民;刘刚;魏菡;李慧颖;朱茂祥;;卷烟烟气对细胞线粒体氧化损伤的研究[J];第三军医大学学报;2008年03期

2 何燕;王衍堂;孙文翠;梁龙;石桂秀;;Gαq对H_2O_2诱导THP-1细胞凋亡的影响[J];现代预防医学;2011年06期

3 刁波;唐瑛;王晓昆;李德忠;;不同浓度H_2O_2体外诱导大鼠海马细胞氧化损伤观察[J];实验动物与比较医学;2008年02期

4 仲伟鉴,周永贵,张荣泉;香烟烟气氧化损伤:β-胡萝卜素效应(英文)[J];环境与职业医学;2004年01期

5 姜苏蓉,刘莉,张小进,程蕴琳;HSPB1对H_2O_2诱导大鼠心肌细胞损伤中线粒体膜电位的影响[J];南京医科大学学报(自然科学版);2005年02期

6 车千红;孟艳;郭佳琦;贾丽红;;硫辛酸对大鼠脑氧化损伤保护作用[J];中国公共卫生;2009年06期

7 孙建华;邢俊平;吴齐飞;薛炜;王新阳;;人精子体外氧化损伤对线粒体tRNA~(LeuUUR)基因的影响[J];中华男科学杂志;2006年12期

8 高瑞娟;睾丸间质细胞睾酮生物合成的局部调节[J];国外医学.计划生育分册;2000年02期

9 田二坡;秦达念;;雄激素受体在睾丸内的分布及与生精调节的关系[J];中国男科学杂志;2007年05期

10 杨建英;张勇法;乔晓岚;;睾丸间质细胞的研究进展[J];医学综述;2009年14期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 朱颖;罗心平;朱军;梁旺;马端;;氧化低密度脂蛋白对脐静脉内皮细胞组织因子途径抑制物2表达的影响[A];第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛论文汇编[C];2008年

2 郎朗;于蕾;邹翔;季宇彬;;苏丹红Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ致小鼠氧化损伤的实验研究[A];提高全民科学素质、建设创新型国家——2006中国科协年会论文集[C];2006年

3 关坤;徐兆发;张芳林;邓小强;徐斌;邓宇;;镉致大鼠肝线粒体氧化损伤的实验研究[A];中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第六届全国学术会议、中国毒理学会遗传毒理专业委员会第五届全国学术会议、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术会议、广东省环境诱变剂学会学术会议论文汇编[C];2008年

4 卓铭;许德华;张润荃;孙兰英;刘新垣;;P-35抗凋亡基因保护PC12细胞免于氧化损伤[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年

5 高键;薛安娜;王淑琴;;同型半胱氨酸诱导ECV304细胞氧化损伤研究[A];中国营养学会第五届老年营养学术会议论文摘要汇编[C];2002年

6 刘晓萍;于业军;袁文丹;潘晓亮;张代军;张菁华;;日本鬼湁螫伤与氧化损伤关系的探讨[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年

7 毕铭华;张淑文;王宝恩;刘树森;宋伟;;内毒素血症早期大鼠肝细胞线粒体呼吸功能的氧化损伤[A];2001年全国中西医结合急救医学学术会议论文集[C];2001年

8 江中发;李宁;张本延;;甲醛对肾组织细胞的氧化损伤影响[A];中国环境科学学会2009年学术年会论文集(第四卷)[C];2009年

9 郭锡熔;池霞;洪琴;张敏;童梅玲;;高糖对原代培养人脂肪细胞线粒体膜电位及胰岛素敏感性的影响[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编(上册)[C];2010年

10 芦玲巧;王红霞;曾翔俊;张冬梅;沈海中;张立克;;CYP2J3基因转染对缺氧后处理大鼠心肌线粒体的影响[A];第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2011年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 ;氯离子通道阻断剂对肺血管内皮细胞氧化损伤的保护作用[N];中国医药报;2003年

2 通讯员施扬记者衣晓峰;中加合作开展糖尿病研究[N];健康报;2002年

3 刘涛先;EGCG具有延缓神经元衰老的作用[N];中国医药报;2002年

4 刘宁春 杨丽佳;雌激素是保护缺血后脑损伤机制之一[N];健康报;2006年

5 记者 冯国梧;脊髓损伤患者有望站起来[N];科技日报;2003年

6 本报记者 王丹;自由基 生命的潜在动力[N];健康报;2008年

7 王珩;论人类衰老与自由基的关系[N];大众科技报;2009年

8 刘海英;氧化应激是基因突变的主要潜在致因[N];科技日报;2009年

9 西安交通大学 刘健康;负氢离子让细胞线粒体更健康[N];科技日报;2011年

10 上海交通大学 丛峰松;负氢离子的抗衰老和抗辐射的研究[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 文圣梅;脑红蛋白与胞红蛋白抗氧化损伤的分子机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年

2 唐传玲;环孢素A缓解人滋养细胞氧化应激损伤的分子机制[D];复旦大学;2012年

3 陈群;氧化应激对动物消化道结构与功能影响的研究[D];江南大学;2007年

4 黄蕤;PMA诱导K562细胞向巨核系分化过程中线粒体功能的变化及机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年

5 江伟;VitA在缺氧缺血脑损伤中的作用及机制研究[D];重庆医科大学;2011年

6 罗文英;肠道病毒71型感染人脑微血管内皮细胞的机制研究[D];南方医科大学;2012年

7 吕铁钢;肠道病毒71型感染致小鼠脑线粒体损伤及可能机制研究[D];青岛大学;2013年

8 冯仁田;衰老的免疫学研究:自然衰老的免疫系统变化和氧化应激对免疫系统的影响[D];中国协和医科大学;2000年

9 徐丹令;乙醛脱氢酶2(ALDH2)对大鼠心肌缺氧损伤的保护作用[D];复旦大学;2006年

10 付红敏;CGRP在高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用及其信号转导途径探讨[D];重庆医科大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 唐湘宇;番茄红素对兔动脉粥样硬化形成和内皮细胞氧化损伤的影响[D];南华大学;2006年

2 杨晨;D-半乳糖诱导小鼠mtDNA损伤的研究[D];第四军医大学;2005年

3 乔琰;气态甲醛致中枢神经毒性效应及其机理探讨[D];华中师范大学;2006年

4 王仁忠;维生素E对链脲菌素所致胰岛β细胞损伤的干预研究[D];重庆医科大学;2007年

5 邱全凤;大鼠再生肝UCP2表达与肝细胞增殖、功能的相关性研究[D];大连医科大学;2007年

6 王敏;联合乙二醇和二甲亚砜玻璃化冷冻人卵裂早期胚胎的研究[D];昆明医学院;2007年

7 张蕊;硫辛酸对氢醌所致V79细胞线粒体膜电位损伤的保护性实验研究[D];中国医科大学;2008年

8 张杰;恒定磁场对Schwann细胞氧化损伤保护作用机理的实验研究[D];山东大学;2007年

9 郑延松;过氧化氢对培养心肌细胞的氧化损伤和褪黑素的心肌保护作用[D];第四军医大学;2001年

10 刘瑶;氧化低密度脂蛋白对红细胞的损伤[D];重庆大学;2005年


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本文编号:508434

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