从MOT、SS及胃肠道ICC细胞探讨柴胡疏肝散促进肝郁模型鼠胃肠动力作用机制的研究

发布时间：2017-07-02 18:57

  本文关键词：从MOT、SS及胃肠道ICC细胞探讨柴胡疏肝散促进肝郁模型鼠胃肠动力作用机制的研究

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【摘要】：目的：观察柴胡疏肝散对肝郁模型鼠胃排空、胃肠激素以及小肠细胞微结构等的影响,从胃肠激素、ICC细胞等角度,揭示该方对肝郁模型鼠胃肠动力的药理学作用及机制,揭示中药从肝治脾整体调节的优势所在。方法：1.肝郁大鼠模型的建立：采用包括禁食、禁水、低温游泳、高温环境、水平震荡、夹尾、昼夜颠倒七种刺激方法,每日随机选用一次,造模3周,并测定造模前后大鼠一般情况、体重、进食量以及强迫游泳不动时间用于评价造模效果。2.柴胡疏肝散对肝郁证大鼠血清MOT、SS及胃排空功能的影响：造模后,按各组剂量每天10 ml·kg-1ig给药2周,柴胡疏肝散高、低剂量组给药浓度分别为：21.0,10.5 g·kg-1,吗丁啉组给药浓度为：10 mg·kg-1,空白组及造模组均给以等体积生理盐水。并于造模前、造模后及给药后分别使用ELISA法测定各组大鼠血清MOT、SS含量,酚红法测定胃排空率。3.柴胡疏肝散对肝郁证大鼠ICC-DMP细胞的影响：取正常组、造模组、给药各组大鼠距离幽门1 cm的上段8 cm的小肠组织,沿系膜缘剖开去除内容物,固定液中固定后常规制备电镜切片,电镜观测ICC-DMP的超微结构。结果：1.实验一结果：造模前后,正常组大鼠的一般状态较为稳定。造模后,造模组大鼠毛发逐渐转为凌乱干结,活动逐渐减少,出现倦怠、乏力、嗜睡等表现；情绪由稳定变为易怒继而低落；进食逐渐减少；大便逐渐变软甚至便溏。造模组强迫游泳不动时间显著延长,与正常组相比,差异显著(p0.01)。体重方面,正常组大鼠的体重稳步增长,而造模组体重增长缓慢甚至出现负增长,差异显著(p0.01)且这种改变与性别无关,胃肠激素方面,造模前后对比,造模各组MOT分泌明显减少(P0.05)而SS分泌均明显升高(P0.05)。2.实验二结果：造模前后对比,实验二结果与实验一基本相似,可认为造模成功。给药后,进食量方面,给药组与正常组进食量相当(P0.05)。且较模型组进食量均有增加(P0.05),其中吗丁啉组日均进食量增加更为明显(P0.01)。体重方面,各组大鼠体重均有回升,尤其以吗丁啉组回升较快,与造模组相比差异显著(P0.05)。给予中药的两组大鼠,低剂量组体重恢复速度较慢,然而高剂量组恢复速度较快。行为学指标方面,造模组不动时间长于空白组(P0.05),而中药高、低剂量组不动时间均显著短于造模组及西药组(P0.05),且中药组间没有明显差异。胃排空方面,正常组及各给药组胃排空率均高于模型组(P0.05),且柴胡疏肝散低剂量组差异更为明显(P0.01),而各治疗组间差异不显著(P0.05)。胃肠激素水平方而,造模组MOT分泌虽有所恢复,与空白组无统计学意义,但是总体仍小于空白组,而给药组MOT水平均高于造模组及空白组(P0.05)。给药后,与正常组相比,吗丁啉组血清SS含量降低(P0.05)。与模型组相比,给药组血清SS含量均有显著下降(P0.01)。4.实验三结果：肝郁证模型组ICC-DMP总体数目减少,与平滑肌细胞及神经纤维末梢有缝隙连接；细胞呈多边形,胞质少,线粒体扩张、脊断裂,粗面内质网扩张,细胞核内常染色质丰富。经高剂量柴胡疏肝散治疗后,ICC-DMP数量明显增加,细胞呈梭形,胞质稀少,胞质内糖原颗粒丰富,部分内质网扩张,细胞核杆状,异染色质丰富,部分线粒体肿胀,但明显少于造模组。低剂量柴胡疏肝散治疗后大鼠小肠ICC-DMP结构改善及数量恢复虽不及高剂量组,但已有好转趋势。吗丁啉组ICC-DMP结构改善尚不明显。结论：1.柴胡疏肝散增加大鼠进食量及体重,缩短强迫游泳的不动时间。2.柴胡疏肝散改善肝郁模型大鼠胃肠动力的机制可能是通过上调血液MOT、SS含量。3.柴胡疏肝散可以一定程度上促进模型大鼠小肠ICC-DMP的数量和形态的恢复。
【关键词】：柴胡疏肝散 慢性不可预知应激 肝郁证 胃动素 生长抑素 Cajal间质细胞
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 英文缩略词表11-12
• 前言12-13
• 第一章 理论研究13-18
• 1. 中医对功能性消化不良的认识13-15
• 1.1 病因病机认识13-14
• 1.2 辨证分型14-15
• 1.3 治疗方法15
• 2. 西医学对于功能性消化不良的认识15-18
• 2.1 对病因认识的进展15-16
• 2.2 对发病机制的研究进展16
• 2.3 功能性消化不良的治疗16-18
• 第二章 实验研究18-37
• 第一节 实验一：肝郁证大鼠模型的建立18-23
• 材料与方法18-19
• 1 材料18
• 1.1 动物18
• 1.2 仪器18
• 1.3 实验试剂18
• 2. 方法18-19
• 2.1 分组与造模18
• 2.2 取材18
• 2.3 指标检测18
• 2.4 数据统计学处理18-19
• 结果19-21
• 3.1 大鼠一般状态观察19
• 3.2 对行为学指标的影响19
• 3.3 对大鼠体重变化的影响19-20
• 3.4 对血清MOT、SS水平的影响20-21
• 讨论21-23
• 4.1 肝郁模型制备的原理21-22
• 4.2 肝郁大鼠行为学指标的变化22
• 4.3 肝郁证大鼠胃肠激素的变化22-23
• 第二节 实验二：柴胡疏肝散对肝郁证大鼠血清MOT、SS及胃排空功能的影响23-31
• 材料与方法23-24
• 1. 材料23
• 1.1 动物23
• 1.2 药物23
• 1.3 仪器与试剂23
• 2. 方法23-24
• 2.1 分组与造模23-24
• 2.2 取材24
• 2.3 指标观测及方法24
• 2.4 统计学数据处理24
• 结果24-29
• 3.1 对大鼠进食量变化的影响24-25
• 3.2 对大鼠体重变化的影响25-27
• 3.3 对大鼠强迫游泳不动时间的影响27
• 3.4 对大鼠胃排空的影响27-28
• 3.5 对大鼠血清MOT的影响28
• 3.6 对大鼠SS的影响28-29
• 讨论29-31
• 4.1 柴胡疏肝散对肝郁证大鼠体重变化的影响29
• 4.2 柴胡疏肝散对大鼠进食量的影响29-30
• 4.3 柴胡疏肝散对肝郁证大鼠行为学指标的影响30
• 4.4 柴胡疏肝散对肝郁证大鼠胃排空率的影响30
• 4.5 柴胡疏肝散对肝郁证大鼠血清MOT、SS的影响30-31
• 第三节 实验三：柴胡疏肝散对肝郁证大鼠ICC-DMP细胞的影响31-34
• 材料与方法31-32
• 1. 材料31
• 1.1 动物31
• 1.2 药物31
• 1.3 仪器与试剂31
• 2. 方法31-32
• 2.1 分组与造模31
• 2.2 取材31
• 2.3 指标观测31-32
• 结果32
• 讨论32-34
• 第四节 参考文献34-37
• 结语37-38
• 附录38-44
• 参考文献42-44
• 攻读硕士研究生期间获得的研究成果44-45
• 致谢45-46
• 个人简历46

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