大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养与CM-DiI荧光标记

发布时间：2017-07-07 18:00

  本文关键词：大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养与CM-DiI荧光标记

  更多相关文章： 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 细胞示踪 CM-DiI CD CD CD 细胞增殖 细胞培养

【摘要】：背景:目前,对骨髓间充质干细胞的分离、纯化和扩增还没有统一的、标准化的方法。CM-DiI作为荧光标记物稳定、可靠、标记率高、标记简便。目的:建立SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养及标记的方法。方法:取2只体质量50-100 g雄性SD大鼠,无菌条件下采集双侧股骨、胫骨骨髓,用全骨髓贴壁分离法和密度梯度离心法培养出原代骨髓间充质干细胞,通过及时、反复传代对细胞进行扩增纯化,在体外用荧光活性染料CM-DiI标记第3代骨髓间充质干细胞后作为供体细胞来源。结果与结论:用全骨髓贴壁分离法和密度梯度离心法两种方法均能成功体外分离培养骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪分析,培养出的细胞CD34阳性率为17.5%,CD44阳性率为97.9%、CD90阳性率为91%,与骨髓间充质干细胞表面抗原一致。但培养出的细胞数量全骨髓贴壁分离法明显多于密度梯度离心法,两种方法培养骨髓间充质干细胞的细胞活力和增殖能力无明显差异。CM-DiI能够成功荧光标记骨髓间充质干细胞,CM-DiI作为荧光标记物稳定、可靠、标记率高、标记简便。
【作者单位】： 昆明医科大学第一附属医院急诊科;
【关键词】： 干细胞 骨髓干细胞 骨髓间充质干细胞 细胞示踪 CM-DiI CD CD CD 细胞增殖 细胞培养
【分类号】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction骨髓间充质干细胞占骨髓有核细胞的百万分之一到十万分之一,故分离高纯度并能良好生长和增殖的骨髓间充质干细胞是原代培养的关键性技术。目前,对骨髓间充质干细胞的分离、纯化和扩增还没有统一的、标准化的方法[1]。常用从骨髓细胞中分离骨髓间充质干细胞的

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本文编号：531195