双歧杆菌肠道内调控表达肠道病毒71型VP1蛋白的实验研究

发布时间：2017-07-15 12:09

  本文关键词：双歧杆菌肠道内调控表达肠道病毒71型VP1蛋白的实验研究

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【摘要】：目的构建重组肠道病毒71VP1基因双歧杆菌,制成口服疫苗,用于EV71感染预防。方法扩增EV71病毒VP1基因并将其插入到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pBBAD/Xs中,构建VP1表达载体(pBBADs-VP1),通过Western blot检测VP1蛋白在pBBADs-VP1转化菌中的表达。选取BALB/c小鼠,分为B-VP1组、VP1组、GFP组和生理盐水组,B-VP1组口服pBBADs-VP1-转化双岐杆菌,VP1组腹腔注射大肠埃希菌表达纯化的重组VP1蛋白,GFP组口服pBBADs-GFP转化双岐杆菌,生理盐水组口服生理盐水,观察pBBADs-VP1-转化双岐杆菌口服免疫对EV71感染的免疫反应:包括病毒的中和抗体滴度、抗EV71-VP1抗体以及诱导脾脏和淋巴集结中Th1免疫反应。结果与GFP组及生理盐水组比较,B-VP1组及VP1组中和抗体滴度及抗EV71-VP1抗体水平,均显著增加;口服表达VP1蛋白长双歧杆菌和注射VP1蛋白都会诱导Th1细胞因子免疫反应(P0.05),表达VP1蛋白长双歧杆菌较易诱导局部肠道的Th1模式,而注射VP1蛋白较易诱导全身性免疫。攻毒试验显示,VPI和B-VP1组新生鼠攻击后第15d(剂量1 000LD50)存活率分别为20.00%和16.67%,对照组无小鼠存活。结论利用长双歧杆菌表达VP1蛋白的口服疫苗可能成功激发针对EV71病毒感染的特异性免疫应答。用表达VP1的重组双歧杆菌免疫母鼠,可以赋予新生小鼠以保护。
【作者单位】： 深圳市南山区人民医院;深圳市内源性感染诊治研究重点实验室;南方医科大学;
【关键词】： 肠道病毒型 VP蛋白 长双歧杆菌 口服免疫
【基金】：深圳市科技创新委员会项目(No.201001023,201202173)
【分类号】：R373.2
【正文快照】： 肠道病毒71型(EV71)为单链RNA病毒,属微小RNA病毒科(Picornaviridae),肠病毒属(Entero-virus)。EV71感染引起手足口病[1],脊髓灰质炎样麻痹[1,2]和致命的脑炎与心肺并发症[3]。近年来,EV71在一些国家和地区流行,严重威胁婴幼儿健康[1~3]。目前尚无有效的抗病毒药物治疗重症EV7

【共引文献】

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本文编号：543782