加热对大鼠表皮干细胞HSP70表达及细胞增殖的影响
本文关键词:加热对大鼠表皮干细胞HSP70表达及细胞增殖的影响
【摘要】:目的分离、培养并鉴定SD大鼠表皮干细胞;观察不同温度加热对表皮干细胞热耐受预测因子HSP70表达和细胞增殖的影响。方法体外分离培养大鼠表皮干细胞,用倒置显微镜观察其形态,以角质形成细胞作为对照;采用细胞免疫荧光技术对β1-整合素、干性标志物K19、α6及分化标志物K10进行鉴定;实验对37、41、43、45、47、49℃热处理的表皮干细胞采用MTT法测定细胞吸光度值,计算细胞存活率;Western blot法测定HSP70表达的变化。结果分离的细胞体积小,核质比大,集落生长,呈典型的铺路石样结构;实验组细胞干性标志物K19、β1-整合素及α6呈阳性表达,分化标志物K10表达阴性;随着温度升高,细胞HSP70表达增加,于47℃时表达量达到峰值,同时细胞随温度升高存活率逐渐降低,于45℃~49℃时降低幅度下降成一水平趋势。结论成功建立了SD大鼠表皮干细胞分离、培养方法,升高温度可抑制表皮干细胞增殖能力,细胞存活率下降,提示HSP70表达增加对表皮干细胞热损伤可能具有保护作用。
【作者单位】: 南华大学附属郴州医院;第三军医大学创伤烧伤与复合伤国家重点实验室四室;
【关键词】: 表皮干细胞 HSP 热损伤
【基金】:第三军医大学创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金资助项目(SKLKF201203)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 我国每年各种烧烫伤患者达数百万之多,烧伤所浸泡1 minx2次。取背部皮肤,去除皮下筋膜,修剪致的皮肤缺损畸形以及功能障碍已成为危害人民群成条状(0.5 cmx3.0 cm),表皮面朝上展平皮肤,漂众健康的多发常见病,表皮干细胞作为皮肤组织的特浮于0.25%胰酶而表皮不被浸没,4t过夜消化
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