巨噬细胞荷脂过程中脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1及中性胆固醇酯水解酶相互结合

发布时间：2017-07-16 09:22

  本文关键词：巨噬细胞荷脂过程中脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1及中性胆固醇酯水解酶相互结合

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【摘要】：目的探讨脂肪分化相关蛋白是否与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1或中性胆固醇酯水解酶相互结合。方法 50 mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育RAW264.7细胞0、0.5、1、3、6 h,使用逆转录-聚合酶链反应及蛋白免疫印迹分析技术检测脂肪分化相关蛋白、酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1和中性胆固醇酯水解酶的mRNA及蛋白的表达;应用免疫共沉淀技术检测脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1或中性胆固醇酯水解酶是否相互结合。结果随着氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞孵育时间的延长,逆转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹分析显示,脂肪分化相关蛋白、酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1和中性胆固醇酯水解酶的mRNA和蛋白质随着时间的延长而增多,与0 h相比,差异有显著性(P0.05,n=3)。免疫共沉淀实验显示,RAW264.7细胞与氧化型低密度脂蛋白孵育0、0.5、1、3 h时脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1结合,6 h时脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1不结合;孵育0、0.5、1 h时脂肪分化相关蛋白与中性胆固醇酯水解酶不结合,3、6 h时与中性胆固醇酯水解酶结合。结论在荷脂的RAW264.7细胞中脂肪分化相关蛋白与中性胆固醇酯水解酶及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1相互结合。脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1和中性胆固醇酯水解酶在细胞内脂质代谢中可能协同作用。
【作者单位】： 河南省平舆县人民医院内分泌科;南华大学心血管病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室;
【关键词】： 脂肪分化相关蛋白 酰基辅酶A 胆固醇酰基转移酶 中性胆固醇酯水解酶 巨噬细胞
【基金】：国家自然科学基金(30971268)
【分类号】：R364
【正文快照】： 动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)斑块的泡沫细胞中,蓄积的脂质主要以脂滴的形式储存于胞浆。脂肪分化相关蛋白(adipophilin)是脂滴外周含量较高的一种不完全包被蛋白[1,2]。人Adipophilin基因编码437个氨基酸组成的蛋白。组织中Adi-pophilin的表达限于某些特定的细胞,如外周

【参考文献】

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1 袁中华;陶媛;刘清南;黄谙非;刘晓辉;田国平;唐朝克;易光辉;王佐;;Calphostin C抑制脂肪分化相关蛋白诱导的ACAT1表达[J];中国动脉硬化杂志;2012年12期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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2 乔运成;黄谙非;田国平;刘晓辉;袁中华;;脂肪分化相关蛋白促进RAW264.7细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1高表达[J];中国动脉硬化杂志;2009年08期

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5 袁中华,杨永宗,尹卫东,易光辉,万载阳;反义adipophilin寡核苷酸降低ACAT活性(英文)[J];生物化学与生物物理进展;2004年10期

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7 刘清南;戴志兵;刘志强;唐朝克;田国平;戴肖松;何求;叶玲;袁中华;;高表达和敲减adipophilin对细胞内ERK1/2活性、PPARγ表达和细胞内脂质蓄积的影响(英文)[J];生物化学与生物物理进展;2011年12期

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【相似文献】

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中国硕士学位论文全文数据库 前3条

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本文编号：548011