IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立

发布时间：2017-07-25 21:21

  本文关键词：IL-31单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立

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【摘要】：目的:制备抗人IL-31单克隆抗体,建立ELISA检测体系。方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗IL-31单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体的亚类、滴度和特异性;采用ELISA技术制备IL-31检测试剂盒,并对自制试剂盒进行评价。结果:获得了两株稳定产生抗IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG3,抗体特异性好,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106。试剂盒检测灵敏度为5.726 pg/ml,检测IL-1、IL-6、TNF-α、RF的P/N值均小于2.1,为阴性,靶抗原IL-31的检测结果为阳性(P/N值=13.76);自制试剂盒检测特应性皮炎血清IL-31水平为(532.83±90.39)pg/ml,对照组血清IL-31水平为(103.31±19.17)pg/ml,皮炎组明显高于对照组,有显著性差异(P0.001)。结论:成功制备了抗IL-31单克隆抗体,建立的ELISA试剂盒可用于临床检测IL-31。
【作者单位】： 遵义医学院第三附属医院骨科;遵义医学院珠海校区免疫学教研室;遵义医学院附属医院检验科;
【关键词】： IL- 单克隆抗体 ELISA
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81260266) 贵州省科技攻关项目(No.黔科合NY20063039号) 贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目(No.黔省专合200951号)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 白细胞介素31(Interleukin-31,IL-31)是近年发现的具有4个螺旋结构的多肽链,为Th2型细胞因子,具有调节细胞增殖分化、促进造血、参与炎症反应等多种生物学功能,是一种重要的炎症因子,在炎症反应和过敏性疾病中发挥重要的作用[1]。我们在前期研究中发现IL-31可诱导皮肤炎症反应

【参考文献】

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【相似文献】

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本文编号：573332