表达绿色荧光蛋白的布鲁氏菌16M和M5侵染小鼠巨噬细胞过程的差异分析

发布时间：2017-07-27 04:02

  本文关键词：表达绿色荧光蛋白的布鲁氏菌16M和M5侵染小鼠巨噬细胞过程的差异分析

  更多相关文章： 布鲁氏菌 绿色荧光蛋白(GFP) 小鼠巨噬细胞 激光共聚焦显微镜 流式细胞仪

【摘要】：通过布鲁氏菌(Brucella)16M(强毒株)和M5(弱毒株)进入小鼠巨噬细胞后产生的荧光强度,结合布鲁氏菌胞内生存能力分析二者侵染小鼠巨噬细胞过程的差异,为布鲁氏菌在细胞内的生存繁殖及其分子机制研究提供理论依据。将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)布鲁氏菌16M(强毒株)和M5(弱毒株)分不同时间段侵染小鼠巨噬细胞(感染复数为100∶1),通过胞内生存实验、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察和检测布鲁氏菌侵入RAW 264.7过程的差异。结果表明,布鲁氏菌16M和M5和GFP的16M和M5侵染RAW264.7的能力不受影响,通过流式细胞仪可以鉴别GFP布鲁氏菌,但是不能确定细菌的存活状态。结合布鲁氏菌16M和M5胞内生存能力分析发现GFP+细胞的增加与活菌培养计数法(colony forming unit,CFU)数量的减少存在一一对应的关系,并且在侵染初期(5~25 min)16M与M5的荧光强度并没有显著差异。结果提示,布鲁氏菌16M和M5在侵染进入宿主细胞的初期即侵袭能力并没有明显差异,认为造成毒力差异的主要原因是两者的繁殖能力。
【作者单位】： 石河子大学生命科学学院;
【关键词】： 布鲁氏菌 绿色荧光蛋白(GFP) 小鼠巨噬细胞 激光共聚焦显微镜 流式细胞仪
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2010-CB530200)
【分类号】：R378.5
【正文快照】： 布鲁氏菌属于革兰氏阴性胞内菌,可以对人类和家畜造成严重的慢性感染。人若患有此病会经常发高烧,精神萎靡,嗜睡,关节炎和脾肿大。在反刍动物中,布鲁氏菌病可导致流产,造成巨大的经济损失。近几年的研究发现布鲁氏菌没有典型的外毒素、Ⅲ型分泌系统等毒力元件,其毒力主要表现

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 陈俊;吴敏;施永超;达剑森;;布鲁氏菌病的研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2014年01期

2 马慧;苟亚峰;刘朋涛;高剑峰;;绵羊布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞的荧光表征与分析[J];石河子大学学报(自然科学版);2014年05期

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 叶婷;小G蛋白Rab6和Ran在对虾和果蝇细胞吞噬及抗病毒中的作用[D];浙江大学;2012年

2 张敏;流产布氏杆菌脂多糖突变株ΔrfbE和ΔrfbD的构建及其生物学特性研究[D];扬州大学;2013年

3 田明星;流产布鲁氏菌毒力基因筛选鉴定及其功能研究[D];中国农业科学院;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李闯;绵羊细胞分裂周期蛋白42全长cDNA克隆、表达及单克隆抗体制备[D];延边大学;2013年

2 吕亚辉;布鲁氏菌Omp25蛋白抑制巨噬细胞分泌TNF-α的分子机制研究[D];西北农林科技大学;2013年

3 桂丹;牛种布鲁氏菌2308株wbkA、pmm基因缺失株的构建及免疫效果的初步研究[D];石河子大学;2013年

4 任晓莉;布鲁氏菌强弱毒株诱导巨噬细胞凋亡机制初步研究[D];石河子大学;2013年

5 王慧;布鲁氏菌外膜蛋白OMP31在细胞凋亡中的调控研究[D];石河子大学;2013年

6 王震;牛种布鲁氏菌强弱毒株差异表达蛋白的功能研究[D];石河子大学;2013年

7 李天森;牛种布鲁氏菌主要外膜蛋白对胞内生存机制的初步研究[D];石河子大学;2013年

8 陈瑞花;布鲁氏菌omp25基因缺失株的构建及对细胞自噬的影响[D];石河子大学;2013年

9 张豫;布鲁氏菌感染巨噬细胞对致炎信号通路影响的初步研究[D];石河子大学;2013年

10 赵云;B0107基因和A1103基因的删除对布鲁氏菌M28强毒株毒力的影响[D];中国农业科学院;2013年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵振祥;赵鸿雁;崔步云;李兰玉;朴冬日;郝素珍;;布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5差异探索[J];中国人兽共患病学报;2009年10期

2 冯建萍，徐历升，田广，胡桂英;布鲁氏菌M5号菌苗畜间气雾免疫对人群影响的评价[J];地方病通报;1996年03期

3 邵水儿;卢兴国;龚旭波;;外周血白血病和MPO阴性M5病例报告[J];浙江临床医学;2007年12期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 刘惠芬;周文华;朱华强;赖苗军;陈为升;刘芳;杨国栋;;VTA中微注射M5毒蕈碱受体反义寡核苷酸抑制海洛因敏化大鼠NAc和海马中FosB表达[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学学术大会论文集[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 修霄云;瑞风M5:中国式公商务轩驾的造型典范[N];政府采购信息报;2013年

2 本报记者　 徐锋;宝马借势推出M5、M6[N];21世纪经济报道;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 宋俊杰;基于M5的片上多核系统平台的设计与实现[D];哈尔滨工业大学;2010年

，

本文编号：579661