人脂肪间充质干细胞体外分离、培养的方法研究

发布时间：2017-08-03 14:35

  本文关键词：人脂肪间充质干细胞体外分离、培养的方法研究

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【摘要】：目的探讨人脂肪间充质干细胞体外分离及培养方法。方法用消化离心的方法获得人脂肪间充质干细胞,以1×104/cm2接种于体积分数为0.1%胎牛血清的LG-DMEM培养基中,并进行细胞形态学观察,绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面抗原,行成脂及成骨诱导检测其多向分化潜能。结果获取的脂肪间充质干细胞大小较为均匀,呈梭形的成纤维细胞样,细胞增殖良好;细胞生长曲线测定表明接种后第4天细胞进入指数增长期,第8天后生长进入平台期,体外能长期培养存活,并保持不分化状态;流式细胞仪检测表明细胞高表达CD13、CD73,低表达CD34、CD45及HLA-DR;能诱导成脂及成骨细胞。结论利用消化离心法在体外能分离得到脂肪间充质干细胞,细胞生长良好,可作为组织工程的种子细胞。
【作者单位】： 解放军总医院南楼临床部消化内科;解放军总医院输血科干细胞试验室;解放军69270部队;
【关键词】： 脂肪间充质干细胞 分离 培养 鉴定
【基金】：国家自然科学基金(30900669) 北京市科技新星计划资助项目
【分类号】：R329
【正文快照】： 急性肝功能衰竭和终末期肝病严重威胁患者的生命,到目前为止,肝移植仍然是其唯一有效的治疗方法,但由于其供体短缺,很多患者在等待中去世,使其在临床上的应用受到了很大的限制[1];生物人工肝及肝组织工程的发展,为患者等待供体及自身的肝脏修复争取了宝贵的时间,延长了生存期

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Raquel Taléns-Visconti;Ana Bonora;Ramiro Jover;Vicente Mirabet;Francisco Carbonell;José Vicente Castell;María José Gómez-Lechón;;Hepatogenic differentiation of human mesenchymal stem cells from adipose tissue in comparison with bone marrow mesenchymal stem cells[J];World Journal of Gastroenterology;2006年36期

【共引文献】

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1 王芋骁;孔志杰;黄溪;马林;;交联改性丝素蛋白材料制备和医学应用[J];现代丝绸科学与技术;2013年05期

2 张宁;摆翔;蒋犁;李伟;;人脐带间充质干细胞对新生鼠脑白质软化灶的神经保护作用[J];东南大学学报(医学版);2012年04期

3 方思维;许朝进;刘慧雯;金明顺;;小鼠脂肪源性干细胞的成骨分化研究[J];现代实用医学;2014年02期

4 唐小洪;叶亚琼;李道通;马浩然;欧阳丹;陈健;马勇江;张媛;李玉谷;;鸡脂肪源间充质干细胞的分离与鉴定[J];华南农业大学学报;2014年05期

5 李俊杰;尹文;洪楠;赵威;;重组腺病毒介导HGF修饰ADSCs对大鼠肝损伤模型的治疗作用[J];现代生物医学进展;2014年06期

6 张云巍;徐丽娟;王淑芳;阎丽;;人脂肪间充质干细胞体外诱导为肝脏样细胞的试验研究[J];首都医科大学学报;2014年05期

7 Karen Bieback;Irena Brinkmann;;Mesenchymal stromal cells from human perinatal tissues: From biology to cell therapy[J];World Journal of Stem Cells;2010年04期

8 房林;宋维铭;;脂肪间充质干细胞多向分化潜能的特征[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年29期

9 姚素艳;杨依勇;秦书俭;郑德宇;;脂肪间充质干细胞的分离培养和鉴定[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年27期

10 Philippe A Lysy;David Campard;Fran oise Smets;Mustapha Najimi;Etienne M Sokal;;Stem cells for liver tissue repair:Current knowledge and perspectives[J];World Journal of Gastroenterology;2008年06期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 张胜利;大鼠脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸成骨的研究[D];中南大学;2007年

2 高嵩涛;组织工程化周围神经修复大鼠坐骨神经损伤的实验研究[D];中南大学;2007年

3 孙玉岭;乙肝相关性肝病肝脏内干细胞样细胞的特性和定向分化[D];浙江大学;2008年

4 王庆;联合基因转染大鼠脂肪来源干细胞构建组织工程骨的实验研究[D];第三军医大学;2013年

5 张嵬;hUC-MSC_S/hHGF基因修饰的hUC-MSC_S移植在心肌损伤修复中的实验研究[D];天津医科大学;2013年

6 赵娴;自体外周血EPCs与BMSCs联合PDPBB构建微血管化生物骨[D];昆明医科大学;2013年

7 杨艳清;乳腺上皮细胞条件培养基对人脂肪干细胞增殖和上皮分化的影响[D];华中科技大学;2013年

8 郝绍瑞;李氏人工肝系统治疗乙肝慢加急性肝衰竭的疗效和预后评价[D];浙江大学;2013年

9 李强;骨髓间充质干细胞和造血干细胞的体内示踪及其促进肝损伤修复的对比研究[D];第四军医大学;2013年

10 潘小平;永生化人肝星状细胞系的建立及其对肝细胞功能与肝祖细胞分化的影响[D];浙江大学;2013年

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1 李德华;单伟;曹云星;秦书俭;;体外分离培养人脐静脉内皮及内皮下间充质干细胞[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年24期

2 陈燕玲;王燕;贲晓明;周晓玉;苗登顺;;表皮生长因子对外周血间充质干细胞原代克隆形成的影响及其传代后多向分化潜能[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年10期

3 ;碱性成纤维细胞生长因子与不同来源间充质干细胞的调控[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年45期

4 李志勇;郭子宽;郭志坤;;释放膜微粒:间充质干细胞治疗的新机制[J];组织工程与重建外科杂志;2012年03期

5 王佃亮;马萍;王烈明;雷宁;吴诚;;间充质干细胞过滤分离器的研制[J];医疗卫生装备;2013年08期

6 廖锋;郑扬;耿彬;唐朝枢;;促进移植间充质干细胞成骨的研究进展[J];基础医学与临床;2013年10期

7 呼莹,王秋英,马丽,马冠杰,姜学英,赵春华;胰腺源间充质干细胞的分离与鉴定[J];中国医学科学院学报;2002年01期

8 王劲,罗成基,郭朝华,张勇;间充质干细胞与相关因子[J];中国实验血液学杂志;2002年05期

9 许琴,朱依纯,肖雁冰,田虹;小鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养[J];遵义医学院学报;2002年02期

10 马丽,呼莹,马冠杰,姜学英,赵春华;小鼠真皮间充质干细胞的生物学特性及促进造血恢复的研究[J];中华血液学杂志;2003年06期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 李艳菊;胡亮杉;郭坤元;;间充质干细胞对衰老大鼠睾丸的影响[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

2 郭勇;张西正;李瑞欣;张春秋;郭春;张彦军;闫玉仙;;力学拉伸对经5-氮胞苷诱导的间充质干细胞向心肌细胞分化的影响[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年

3 李力;王海燕;杜娟;赖洁娟;刘庆;黄苏娜;蒋建新;;直流电刺激对人脐带间充质干细胞物理特性的影响实验研究[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

4 马丽;呼莹;马冠杰;姜学英;赵春华;;小鼠真皮间充质干细胞的生物学特性及对造血恢复的影响[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年

5 韩钦;刘艳宁;何东南;闫曦;曹莹;赵春华;;分离和鉴定小肠上皮干细胞及其可塑性与间充质干细胞的比较[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

6 刘晓丹;刘兵;李秀森;毛宁;;人脐带间充质干细胞的分离与培养[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年

7 姜玉玲;乔虹;刘梦雪;李强;孙玉倩;张巾超;;瘦素诱导体外培养大鼠脂肪间充质干细胞凋亡[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年

8 肖娜;郭锦鹏;赵秀华;金文静;卢光t;程腊梅;;不同来源间充质干细胞的生物学特性比较[A];湖南省生理科学会2008年度学术年会论文摘要汇编[C];2008年

9 陈广华;杨婷;付t$t$;苗瞄;金正明;唐晓文;韩悦;何广胜;仇慧英;马骁;陈峰;薛胜利;王荧;孙爱宁;吴德沛;;脐带间充质干细胞治疗糖皮质激素耐药的难治性急性移植物抗宿主病19例分析[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年

10 洪珞珈;赵明明;张宇晶;;间充质干细胞与系统性红斑狼疮[A];2012年全国微循环与血液流变学基础研究及临床应用学术研讨会专题报告及论文集[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 满学杰;天津滨海新区建最大间充质干细胞生产基地[N];新华每日电讯;2008年

2 满学杰;津昂赛打造间充质干细胞生产基地[N];医药经济报;2008年

3 第三军医大学西南医院输血科 李忠俊 整理 吴刘佳;间充质干细胞研究又见新方法[N];健康报;2013年

4 上海生科院 上海交大医学院健康科学研究所 曹楷;间充质干细胞：干细胞中的孙悟空[N];上海科技报;2014年

5 记者　陈建强;首家间充质干细胞库在津建成[N];光明日报;2006年

6 记者　冯国梧;细胞产品国家工程中心建设方案获准[N];科技日报;2007年

7 实习生 刘霞;间充质干细胞有望用于面部整形[N];科技日报;2007年

8 本报记者 王新佳;我国“原始间充质干细胞”注射液进入临床研究[N];中国高新技术产业导报;2005年

9 冯国梧;全球首个脐带间充质干细胞库规模化运营[N];科技日报;2008年

10 刘莹清;全球首个脐带间充质干细胞库泰达规模运营[N];北方经济时报;2008年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 陈亮;胰岛素样生长因子1增强骨形态形成蛋白9介导的间充质干细胞成骨分化及成骨作用的研究[D];重庆医科大学;2010年

2 郑宗梅;脂肪间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞的实验研究[D];中国协和医科大学;2006年

3 王宪英;脑组织微环境及神经甾体对脐带间充质干细胞分化的影响[D];河北医科大学;2012年

4 李晓东;牙胚间充质干细胞在不同条件下牙向分化的实验研究[D];四川大学;2004年

5 郭虹;胎儿多种组织间充质干细胞生物学特征及胎儿骨髓血液血管干细胞特性的研究[D];中国协和医科大学;2003年

6 侯静;间充质干细胞在辐射损伤后干性维持的机制研究[D];第二军医大学;2013年

7 袁茵;人脐带间充质干细胞对不同类型肿瘤细胞恶性表型的调控作用研究[D];南方医科大学;2014年

8 来晓瑜;一个新的人间充质干细胞特异性表面抗原的鉴定和间充质干细胞亚群生物学特性的研究[D];浙江大学;2009年

9 韩春;牙根发育期相关间充质干细胞生物学特性的研究[D];第四军医大学;2009年

10 孙念政;胎盘间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞及其对糖尿病鼠降糖作用的研究[D];山东大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王敏;羊膜间充质干细胞克隆的分离和生物学特性的研究[D];华东理工大学;2010年

2 苏晓华;牛胎肝间充质干细胞的分离培养及生物学特性研究[D];东北林业大学;2011年

3 邓长卿;脐带间充质干细胞生物学特性及功能研究[D];苏州大学;2011年

4 杨晨;脐带间充质干细胞的分离鉴定[D];吉林大学;2013年

5 马云鹏;应用大块平铺法对人脐带间充质干细胞分离、传代、冻存及复苏的研究[D];河北医科大学;2013年

6 那仁格日勒;溶血磷脂酸抑制人脐带间充质干细胞凋亡及其分子机理[D];内蒙古大学;2013年

7 王黎明;脐带间充质干细胞的分泌蛋白表达谱研究[D];安徽医科大学;2014年

8 唐秋灵;人脐带间充质干细胞向男性生殖细胞分化的研究[D];汕头大学;2008年

9 徐小霞;人胎盘绒毛层间充质干细胞体外培养的优化及生物学特性的初步分析[D];苏州大学;2009年

10 王建军;成人脂肪间充质干细胞体外长期培养及成骨潜能的实验研究[D];兰州大学;2009年

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