自噬与模式识别受体在小鼠Sertoli细胞及附睾上皮细胞天然抗病毒反应中的功能

发布时间：2017-08-06 09:09

  本文关键词：自噬与模式识别受体在小鼠Sertoli细胞及附睾上皮细胞天然抗病毒反应中的功能

  更多相关文章： Sertoli细胞 附睾上皮细胞 天然抗病毒反应 模式识别受体 自噬

【摘要】：背景与目的：睾丸与附睾会受到多种病原体(细菌、病毒、真菌和寄生虫)的感染,损伤男性生育。组织特异细胞具有抵御病原体的天然防御功能,其调节机制有待研究。Sertoli细胞中的模式识别受体Toll样受体3(TLR3)可以启动天然抗病毒反应。自噬可以直接清除病原体,也可以调节天然免疫。本论文旨在分析Sertoli细胞中自噬和TLR3信号通路的相互调节机制,以及附睾上皮细胞(EEC)的天然抗病毒机制。材料与方法：利用TLR3敲除小鼠为模型、结合RNA干扰技术研究相关基因的功能。通过Real-time qRT-PCR定量分析基因mRNA的表达水平；利用Western blot和免疫组化研究蛋白的表达及定位；利用ELISA来测定细胞因子浓度；利用poly(I；C)转染细胞和小鼠,模拟病毒感染；利用雷帕霉素(Rap)和巴弗洛霉素(Baf-Al)调节白噬。结果：两个重要的白噬调节基因beclin-1和LC3在Sertoli细胞中高表达；在受到配体poly(I:C)刺激之后,野生型小鼠Sertoli细胞中的免疫调节因子IFN-p以及抗病毒蛋白ISG15、OAS1和MX1的表达水平明显升高,但TLR3敲除之后这些因子和蛋白的表达受到抑制；干扰素调节因子3(IRF3)参与poly(I:C)诱导的Sertoli细胞的天然抗病毒反应；Poly(I:C)转染能促进Sertoli细胞的白噬；自噬能促进抗病毒应答。附睾上皮细胞表达TLR3和RIG-I,并可被poly(I:C)激活,启动抗病毒反应。结论：Sertoli细胞中的模式识别受体TLR3,在受到配体刺激之后能介导天然抗病毒反应。Poly(I:C)转染Sertoli细胞能促进其自噬,自噬也能促进Sertoli细胞的抗病毒应答。附睾上皮细胞表达TLR3和RIG-I,并启动附睾的天然抗病毒反应。
【关键词】：Sertoli细胞 附睾上皮细胞 天然抗病毒反应 模式识别受体 自噬
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 缩略语表6-8
• 前言8-15
• 实验材料15-27
• 实验方法27-37
• 实验结果37-53
• 讨论53-57
• 小结57-58
• 参考文献58-64
• 论文综述64-73
• 参考文献70-73
• 发表文章73-74
• 致谢74-75

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