过表达肝细胞核因子4alpha对人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的作用

发布时间：2017-08-07 01:10

  本文关键词：过表达肝细胞核因子4alpha对人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的作用

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【摘要】：目的应用转基因技术将肝细胞核因子4alpha(HNF-4α)转导入人骨髓间充质干细胞(MSCs)内,使其连续过表达HNF-4α并促进MSCs向肝样细胞分化。方法 HNF-4α基因通过慢病毒表达载体pLV/Final-puro-hHNF4α-hrGFP转入人MSCs(UE7T-13细胞)内,用流式细胞分析法检测及分选后,收集hrGFP阳性的UE7T-13细胞进行扩增。体外成肝诱导一周后,免疫荧光染色检测过表达HNF-4α基因的UE7T-13细胞(E7-hHNF-4α细胞)的白蛋白(ALB)和细胞角蛋白(CK18)的表达情况,糖原染色检测UE7T-13细胞及E7-hHNF-4α细胞的糖原储存功能。结果建立稳定、过表达hHNF-4α基因的E7-hHNF-4α细胞,持续过表达HNF-4α促进MSCs向肝样细胞分化,经过7天体外成肝诱导,E7-hHNF-4α细胞具有成熟肝样细胞表达ALB和CK18蛋白及糖原储存功能。结论利用Gateway技术可将HNF-4α高效转导入人MSCs细胞中,并有效促进MSCs向肝样细胞分化。
【作者单位】： 中山大学附属第三医院放射科;
【关键词】： 肝细胞核因子α 间质干细胞 细胞分化
【基金】：国家自然科学基金(81071206、81172193、81201090、81070349、81371655) NSFC-广东联合基金重点项目(U1032002) 卫生部临床学科重点项目(164)
【分类号】：R329
【正文快照】： 肝移植是目前唯一证实对肝硬化、肝衰竭等终末期肝脏疾病有效的临床治疗手段,但由于肝脏来源缺乏、免疫排斥等因素,使其在临床上难以广泛开展[1-2]。细胞移植可能改善患者肝功能,修复、重建受损的肝脏,在替代及过渡支持肝移植的治疗中有一定的应用价值[3]。尽管目前大部分动物

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本文编号：632201