绿原酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

发布时间：2017-08-09 14:17

  本文关键词：绿原酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

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【摘要】：目的合成绿原酸(chlorogenic acid,CHA)人工抗原,制备CHA多克隆抗体,为制备过敏成分分析的免疫芯片奠定基础。方法采用碳二亚胺法分别合成CHA免疫抗原(CHA-牛血清白蛋白)和包被抗原(CHA-卵清蛋白);UV法和TLC法鉴定人工抗原偶联是否成功;间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗体效价;间接竞争ELISA方法检测抗体特异性。结果经UV法和TLC法检测,CHA与BSA偶联成功。血清抗体效价为1∶128 000,CHA-PAbs的质量浓度与抑制率的线性方程为Y=-0.10 lnX+1.158,线性检测范围为15.6~250 ng/mL,R2=0.995,并且和甘草酸、黄芩苷等与其常配伍应用的中药化合物均无交叉反应。结论成功制备了灵敏度高、特应性好的CHA多克隆抗体,为CHA的微量检测和过敏性研究提供了实验依据。
【作者单位】： 北京中医药大学基础医学院;北京中医药大学"经典方剂的应用基础研究"创新团队;北京中医药大学科研实验中心;
【关键词】： 绿原酸 人工抗原 多克隆抗体 碳二亚胺法 免疫分析
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81274043,81373542) “重大新药创制”国家专项课题(2010ZX09502-002)
【分类号】：R392
【正文快照】： 绿原酸(chlorogenic acid,CHA)具有抗氧化、抗炎、抗菌等多方面的药理作用[1-2],是清开灵、热毒宁、双黄连、鱼腥草、茵栀黄等中药注射剂中的主要有效成分之一。但近年来,有学者认为CHA可能是引起上述中药注射剂不良反应的主要原因[3]。动物实验也证明,CHA可以作为一种半抗原

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本文编号：645707