应用免疫磁珠分离法纯化弓形虫速殖子的研究

发布时间：2017-08-12 16:09

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【摘要】：目的用免疫磁珠分离法分选弓形虫速殖子,以去除宿主细胞成分,并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响,为弓形虫的基础与临床研究提供技术基础。方法采用弓形虫Wh3株(China 1基因型)速殖子感染小鼠,提取腹腔液,常规方法制备速殖子可溶性抗原,免疫家兔,获得兔抗弓形虫多克隆IgG抗体。用抗体包被的免疫磁珠对小鼠腹腔液内弓形虫速殖子进行纯化,比较其纯度、回收率、虫体活力、毒力与感染性。结果用免疫磁珠分离技术纯化弓形虫速殖子后,其纯度提高到98.2%,细胞清除率为96%,虫体回收率为73.5%;用内盐法(MTS)细胞增殖与毒性检测试剂盒检测分离后的速殖子活性为95.6%。定量分组感染小鼠后死亡时间无显著性差异。结论免疫磁珠分离的速殖子纯度、细胞清除率和虫体回收率较高,能有效去除宿主细胞,且对速殖子的活性和毒力无影响。该法操作简便快速,无需昂贵的仪器设备,具有较大的实用价值。
【作者单位】： 安徽医科大学病原生物学教研室 安徽病原生物学省级实验室 安徽省人兽共患病重点实验室;安徽医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室;
【关键词】： 弓形虫 速殖子 纯化 免疫磁珠分离
【基金】：国家重点基础研究发展计划资助(973计划)(编号:2010CB530001)
【分类号】：R382
【正文快照】： 弓形虫是一种广泛寄生于人和多种动物有核细胞内的机会致病性原虫,能造成多脏器和组织损害而引起人畜共患的弓形虫病。弓形虫病分布广泛,据文献[1]报道全球约有1/3人血清试验呈阳性反应。由于该虫是有核细胞内的专性寄生原虫,因此在弓形虫和弓形虫病的基础和临床研究中,以及

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本文编号：662450