体外原代星形胶质细胞分离培养方法的优化

发布时间：2017-08-18 06:10

  本文关键词：体外原代星形胶质细胞分离培养方法的优化

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【摘要】：目的:通过对国内外原代培养星形胶质细胞的不同方法的比较运用,旨在优化现有的星形胶质细胞(AS)分离培养方法,建立稳定,高产的培养模式,为进一步研究奠定基础。方法:结合自有实验室条件采用优化的胰蛋白酶消化组织块分离培养法获取AS,进行形态学观察,绘制生长曲线,对培养的细胞进行GFAP免疫荧光鉴定。结果:体外培养的原代AS 7~10d基本融合,胞体不规则,突起丰富如网状,生长曲线符合正常细胞生长特性;免疫荧光染色显示细胞纯度可达95%以上。结论:优化的胰蛋白酶消化组织块分离培养法对AS的培养更适宜自有实验室条件,可获得稳定纯度较高的AS,为中枢神经系统疾病相关研究提供了新的基础。
【作者单位】： 广西医科大学护理学院;
【关键词】： 星形胶质细胞 体外培养 鉴定 大鼠
【基金】：国家863计划课题(No.2004AA2Z3C60) 广西医疗卫生重点科研课题(No.2011046)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 神经胶质细胞是构成神经组织的两大类细胞之一,其生物学作用越来越受到重视,而星形胶质细胞(astrocyte,AS)是其中的主要部分,在神经系统发育、突触传递、神经系统内环境的稳定和新陈代谢等中枢神经系统的多种正常生理活动,以及神经疾病的病理机制中都起着十分重要的作用[1]。

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 石军,张可成,蔡文琴;大鼠脑皮质星形胶质细胞的限制性细胞培养[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2000年02期

2 薛庆善,肖渝平;神经胶质细胞的体外培养方法[J];解剖科学进展;1999年02期

3 王伟;徐忠东;陶瑞松;;大鼠皮层星形胶质细胞体外培养的对比研究[J];合肥学院学报(自然科学版);2014年01期

4 俞爱青;崔红梅;周志俊;;新生鼠星形胶质细胞分离培养方法[J];毒理学杂志;2009年01期

5 顾蓓;刘玉琴;张永鹏;张宏;王春景;苏小玲;董继红;;视神经星状胶质细胞的培养[J];中国当代医药;2009年10期

6 杜方;吴小梅;朱俐;;小鼠大脑皮层星形胶质细胞不同体外培养方法的比较[J];江苏大学学报(医学版);2006年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 周洪语,路丽明,沈建康,罗其中;SD大鼠星形胶质细胞的原代培养[J];中华神经医学杂志;2003年05期

2 徐剑文,王玮,康仲涵,张更,周琳瑛;低氧对体外培养小鼠星形胶质细胞超微结构的影响[J];福建医科大学学报;2003年01期

3 胡玲;陈锐;陈晓刚;余彬华;刘敏;;体外培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞损伤后TGF-β1表达研究[J];中国法医学杂志;2010年06期

4 胡玲;陈锐;余彬华;陈晓刚;刘敏;;体外培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞损伤后bFGF的表达[J];法医学杂志;2009年05期

5 程淑意;陈云波;;大鼠星形胶质细胞的体外培养与鉴定[J];广西医学;2009年11期

6 郭慧;毛萌;俞丹;周晖;童煜;;大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养改良方法的研究[J];中国当代儿科杂志;2014年12期

7 贾庆华;哈小琴;蒋军军;吕同德;;乙酸铅对人星形胶质细胞超微结构及凋亡相关蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响[J];环境与健康杂志;2010年11期

8 胡玲;余彬华;陈晓刚;陈锐;刘敏;;S100β在体外培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞损伤后的表达研究[J];华西医学;2009年09期

9 李曼霞;董志;;西维来司钠在离体星形胶质细胞缺血性损伤中的作用研究[J];解放军药学学报;2008年03期

10 黄艳丽;许蕾;段伟松;蒋怡芳;姜虹;郭艳苏;范志亮;张瑞燕;任文博;李春岩;;小鼠脊髓原代星形胶质细胞培养方法的建立[J];脑与神经疾病杂志;2009年03期

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 徐颖;可调控表达脑啡肽的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建及其镇痛效应研究[D];华中科技大学;2007年

2 谭军;星形胶质细胞条件培养液对缺氧/复氧损伤神经元的保护作用及其机制探讨[D];郑州大学;2013年

3 张辰;农药毒死蜱对大鼠皮层神经细胞的毒性及儿童监护人农药使用行为调查[D];中南大学;2014年

4 何璐;孕酮对OGD/R损伤的星形胶质细胞AQP4的影响及机制[D];天津医科大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王琴;牛磺酸联合硫酸镁对急性重型颅脑创伤大鼠治疗作用的研究[D];天津医科大学;2008年

2 赵燕;盐酸法舒地尔对体外培养的星形胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用和机制探讨[D];华中科技大学;2010年

3 张敬各;局部脑缺血时PAF对星形胶质细胞GFAP表达及SD作用机制的研究[D];昆明医学院;2003年

4 高磊;缺氧/复氧对星形胶质细胞AQP4表达的影响[D];吉林大学;2004年

5 李向宁;用多电极阵列系统研究神经元网络的发育规律[D];华中科技大学;2004年

6 冯梅;人参皂苷Rg1对Aβ诱导的星形胶质细胞核因子-κB活化及炎性反应机制的影响[D];广州中医药大学;2005年

7 刘新颖;成年大鼠海马神经细胞的体外培养[D];西北农林科技大学;2005年

8 焦晓阳;脑不对称影响神经免疫内分泌的细胞学基础[D];汕头大学;2005年

9 程新旺;RNA干扰对马桑内酯诱导的鼠脑星型胶质细胞多重耐药蛋白PGP表达抑制的研究[D];四川大学;2005年

10 杨晓霞;星形胶质细胞微丝表达与细胞缝隙连接的关系及其在癫痫发病中的意义[D];四川大学;2005年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 伍亚民,马海涵,廖维宏;大鼠星形胶质细胞和少突胶质细胞的纯化培养与鉴定[J];创伤外科杂志;2000年04期

2 屈卫东,彭晓东,吴德生,肖帮良,翁贵武,刘发才;星形胶质细胞、少突胶质细胞分离培养新方法研究[J];卫生研究;1999年05期

3 罗贤民,魏厚仁,刘绍春,吕源淑;人眼筛板细胞体外培养的研究[J];中华眼科杂志;1997年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚君茹,潘三强,吕来清;星形胶质细胞的可塑性[J];解剖学研究;2002年01期

2 陈yN招,徐如祥,徐宗俊,杨志林,姜晓丹;星形胶质细胞可以诱导内皮细胞系紧密连接的形成[J];细胞生物学杂志;2003年05期

3 陈青;刘传勇;;星形胶质细胞的活化机制及功能研究[J];泰山医学院学报;2006年01期

4 郭进;何建平;安书成;;星形胶质细胞释放谷氨酸的途径及其调控机制[J];陕西师范大学继续教育学报;2006年03期

5 陈玉敏;陈涛平;;星形胶质细胞的研究进展[J];现代中西医结合杂志;2008年28期

6 李丽华;张余;黄金龙;李梅;夏虹;侯丽;;脱细胞异种骨对星形胶质细胞的影响[J];广东医学;2014年10期

7 杨志军,魏玲;星形胶质细胞生物学功能研究进展[J];中华神经医学杂志;2003年05期

8 徐伟;徐钤;;星形胶质细胞的生物学功能[J];生命的化学;2010年01期

9 胡沙;;星形胶质细胞生物学功能研究进展[J];淮南职业技术学院学报;2010年01期

10 ;研究人员发现星形胶质细胞可调节呼吸强度[J];中国科技信息;2010年17期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 曾俊;李康生;;柯萨奇病毒感染星形胶质细胞及细胞因子变化研究[A];新发和再发传染病防治热点研讨会论文集[C];2010年

2 鲍欢;徐晓云;顾晓波;徐霞红;胡晖;;缺氧后水通道蛋白4在体外培养星形胶质细胞表达变化的实验研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年

3 曹荣;饶志仁;;低渗刺激后缝隙连接蛋白在培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和神经元的表达变化[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

4 邓方;冯加纯;饶明俐;;大鼠星形胶质细胞缺氧/再复氧损伤中缝隙连接功能变化规律及机制[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年

5 武明明;孙晓川;殷成;周帅;吴海涛;;载脂蛋白E基因多态性与星形胶质细胞损伤后兴奋性氨基酸变化的实验研究[A];中国医师协会神经外科医师分会第六届全国代表大会论文汇编[C];2011年

6 周晓燕;邬力祥;刘发益;曹莉;;大鼠脑星形胶质细胞的培养方法[A];湖南省生理科学会新世纪学术年会论文摘要汇编[C];2002年

7 王磊;蔡景霞;;星形胶质细胞膜流动性的钙调节机制[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

8 王萍;王伟;;大鼠脑缺血再灌注后星形胶质细胞的细胞周期变化研究[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

9 邓方;冯加纯;饶明俐;;大鼠星形胶质细胞缺氧/再复氧损伤中缝隙连接功能变化的规律及机制[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年

10 孙圣刚;周敬华;;凝血酶对大鼠原代星形胶质细胞水孔蛋白-4表达的影响[A];第九次全国神经病学学术大会论文汇编[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前7条

1 记者 胡德荣;星形胶质细胞由“天使”变“魔鬼”原因找到[N];健康报;2012年

2 记者 刘海英;星形胶质细胞可调节呼吸强度[N];科技日报;2010年

3 刘霞;脑内星形胶质细胞在实验室培育成功[N];科技日报;2011年

4 汪敏华;大脑星形胶质细胞有两种新功能[N];解放日报;2003年

5 吴一福;黄芪可调节星形胶质细胞“时间模式”[N];中国医药报;2005年

6 南方日报记者 曹斯　实习生 赵莞 张宁 通讯员 邹莹 张淼;用ATP对抗不快乐[N];南方日报;2013年

7 记者 班玮;德国脑细胞再生研究取得新进展[N];人民日报;2010年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 高蓓;视上核星形胶质细胞对急性腹腔高渗刺激引起的神经元反应的调节及其机制[D];第四军医大学;2008年

2 李学忠;星形胶质细胞在脂多糖诱导的多巴胺神经元损伤中的作用[D];苏州大学;2008年

3 曹旭;1，5-二咖啡酰奎宁酸预处理对星形胶质细胞脑缺血模型的保护作用及机制的研究[D];华中科技大学;2010年

4 黄晓佳;5-脂氧酶和半胱氨酰白三烯受体在大鼠星形胶质细胞缺氧缺糖损伤中的作用[D];浙江大学;2007年

5 王萍;星形胶质细胞与神经元细胞周期调控机制研究[D];华中科技大学;2006年

6 柳秀平;蛋白磷酸酯酶-2A对星形胶质细胞迁移的促进作用及其机制研究[D];华中科技大学;2012年

7 徐光锦;大鼠海马脑片星形胶质细胞线性膜电导及细胞间电偶联特性的研究[D];华中科技大学;2009年

8 李昕华;缺血预处理星形胶质细胞神经保护作用机制研究[D];吉林大学;2008年

9 张皓云;星形胶质细胞在帕金森病神经元铁代谢紊乱中的调节作用研究[D];青岛大学;2013年

10 张娟;皮质星形胶质细胞细胞因子不对称分布的研究[D];汕头大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 曾俊;柯萨奇病毒感染星形胶质细胞及细胞因子变化研究[D];汕头大学;2010年

2 胡佳;星形胶质细胞参与脂多糖致大鼠感染性脑水肿的作用机制[D];重庆医科大学;2011年

3 韦颖;党参成分对星形胶质细胞缺氧缺糖/再给氧损伤的保护作用[D];北京中医药大学;2005年

4 杨晓霞;星形胶质细胞微丝表达与细胞缝隙连接的关系及其在癫痫发病中的意义[D];四川大学;2005年

5 李会莉;老龄大鼠脊髓背角神经元和星形胶质细胞在病理性痛信息加工处理中的作用[D];第四军医大学;2004年

6 彭会明;抗CD81抗体对星形胶质细胞的增殖抑制作用[D];华中科技大学;2006年

7 秦爱萍;自噬/溶酶体途径在缺血缺氧性星形胶质细胞损伤中的激活及在其细胞死亡中的作用[D];苏州大学;2008年

8 周欣;缺氧诱导的星形胶质细胞源性血管内皮生长因子对共培养的脑微血管内皮细胞的影响[D];泰山医学院;2007年

9 孙缦利;星形胶质细胞在桶状皮层功能及可塑性中的作用[D];浙江大学;2011年

10 袁彬;转化生长因子-β1对大鼠星形胶质细胞结缔组织生长因子表达的影响[D];新乡医学院;2007年

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本文编号：693005