重组IL-1β蛋白表达纯化及佐剂效应的评价

发布时间：2017-08-18 21:16

  本文关键词：重组IL-1β蛋白表达纯化及佐剂效应的评价

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【摘要】：目的应用原核表达系统制备IL-1β重组蛋白,并作为流感喷鼻疫苗的佐剂,研究其作为喷鼻疫苗佐剂的有效性。方法从Genbank获得IL-1β的基因cDNA序列,在大肠杆菌中表达。分离纯化表达产物,与甲型H1N1流感喷鼻疫苗均匀混合,免疫Balb/c小鼠,通过对体液免疫、黏膜免疫和细胞免疫水平的检测,证明rIL-1β蛋白佐剂的有效性。结果 rIL-1β蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量约是30%,纯度是94.5%。制备的rIL-1β蛋白具有无毒、稳定和良好的生物活性。通过对小鼠的免疫实验证明,rIL-1β作为喷鼻疫苗佐剂对体液、黏膜和细胞免疫应答均有良好的增强效果。结论 rIL-1β蛋白具有黏膜佐剂的作用,为深入研究佐剂效应提供了实验数据。
【作者单位】： 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室;
【关键词】： 白介素-β 原核表达 蛋白纯化 佐剂
【分类号】：R392.3
【正文快照】： IL-1是一类由单核巨噬系统分泌的多功能细胞因子,主要由巨噬细胞和单核细胞分泌[1]。其家族由11种不同的成员,分别为IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-18、IL-1(F5-F10)和IL-33[2]。它们有部分的氨基酸同源性,其中IL-1β是其中已知的行使生物学功能的重要成员之一[3]。IL-1β与其他

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王焕芹;梁淑娟;刘艳艳;李青春;肖伟玲;李若葆;;pLIVE-IL-1β表达载体的构建及在Hepa1-6细胞的表达[J];潍坊医学院学报;2008年03期

2 崔玉秀;马少林;孙红岩;吴振永;侯铁永;胡菊;曾瑞红;;细胞因子佐剂IL-23、IL-27对呼吸道合胞病毒重组蛋白疫苗免疫原性的影响[J];免疫学杂志;2013年07期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王丽芳;单保恩;单铁强;;香加皮三萜类化合物对甲基苄基亚硝胺诱导的食管癌大鼠调节性T细胞功能的影响[J];癌变·畸变·突变;2010年03期

2 王兴满;汤仁树;俞海洋;赵俊;王明丽;;两种细胞株滴定重组猪α干扰素效价的比较研究[J];现代农业科技;2009年24期

3 侯伟,钱冬萌,闫志勇,赵百慧,付强,王斌;基因变构IL-2重组克隆的构建[J];青岛大学医学院学报;2003年01期

4 郭建,宋达琳,王燕鸣;糖尿病并发感染大鼠模型建立及TNFα的变化[J];青岛大学医学院学报;2005年01期

5 孟林;刘明军;王斌;钱冬萌;;~(88)Arg IL-2的克隆构建及原核表达[J];青岛大学医学院学报;2006年04期

6 陈黎龙;朱晓彤;江青艳;高萍;束刚;傅伟龙;;三肽囊素对鸡脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2和IL-6分泌及其基因表达的影响[J];动物学报;2006年01期

7 刘晓勇,张海燕,吕婴,李卫红;碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖与ALP活性表达的影响[J];北京口腔医学;2001年02期

8 张建鹏,李翠英;口腔肿瘤中转化生长因子β对纤维连接蛋白可变剪切区的调节作用[J];北京口腔医学;2005年01期

9 陈翠丽,施定基;转人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)基因的鱼腥藻的构建[J];北京联合大学学报(自然科学版);2005年03期

10 陈素娟,董晓军,孙晓丽,钟晖;白细胞介素-4放射免疫分析法的建立及其初步应用[J];标记免疫分析与临床;2002年01期

中国重要会议论文全文数据库 前6条

1 赵丹萍;陶彬;陈立功;李艳琴;宋勤叶;李潭清;杨芳;李红园;袁洪兴;;PCV2感染对猪瘟弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年

2 王英年;刘加洪;孙荣丽;张可佳;官明德;于华;李黎;张春玲;;P-选择素、IL-1α、sFas、sFasL、AM检测对结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断价值暨与CEA比较系列研究[A];结核与肺部疾病论文集[C];2005年

3 陈晓;陈莉;陈亚琼;杨振华;;T_(H1)型/T_(H2)型细胞因子对体外培养人早孕滋养层细胞HCG分泌及其PCNA和Bcl-2表达的影响[A];第四届全国不孕症暨保留生育功能微创手术研讨会论文集[C];2010年

4 雷楗勇;张莲芬;杨健良;金坚;;人β干扰素-血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年

5 孟凡会;田青武;曹永献;刘忠强;孙波;赵洪国;;深低温冻存对脐血单个核细胞免疫特性影响的研究[A];第五届全国低温生物医学及器械学术大会会议论文集[C];2006年

6 赵仓焕;朱小华;盛佑祥;;IL-2穴位注射对佐剂性关节炎大鼠炎症局部POMCmRNA和PENKmRNA表达的影响[A];中国针灸学会针灸文献专业委员会2007学术年会论文集[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 姜淑贞;玉米赤霉烯酮对断奶仔猪的毒性初探及改性蒙脱石的脱毒效应研究[D];山东农业大学;2010年

2 陈志芬;人白细胞介素15与18协同作用肿瘤浸润淋巴细胞对结肠癌细胞杀伤功能的研究[D];武汉大学;2010年

3 孙叙敏;复方阿胶浆协同化疗的减毒增效作用及其机制实验研究[D];北京中医药大学;2011年

4 陆晔斌;低氧诱导胰腺癌免疫逃逸机制及相关信号通路的初步研究[D];中南大学;2010年

5 卫娜;鹅白细胞介素2受体α链与白细胞介素18特性的初步研究[D];东北农业大学;2011年

6 魏萍;SAg-SEB和MDV诱导雏鸡与荷瘤小鼠免疫学变化及细胞凋亡的研究[D];东北农业大学;2000年

7 李术;奶山羊氟病毒理学的研究[D];东北农业大学;2001年

8 宋慧锋;人胎儿皮肤无瘢痕愈合机制的实验研究[D];第二军医大学;2001年

9 刘辉;LPS诱导的巨噬细胞珠高、低反应并存及其机制的研究[D];第二军医大学;2001年

10 张巧艳;中药蛇床子的植物资源、种内变异和抗骨质疏松研究[D];第二军医大学;2001年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 陈玉红;生物活性预混料对断奶仔猪免疫功能影响的研究[D];华中农业大学;2010年

2 吴学宝;猪瘟病毒影响RANTES产生分子机制的研究[D];华中农业大学;2010年

3 张元鹏;趋化因子类病毒受体的研究[D];山东农业大学;2010年

4 梅雪;毒素清对肺炎痰热证大鼠肺组织JAK/STAT信号转导通路的影响[D];河南中医学院;2010年

5 兰海滨;白附子混悬液对H_（22）荷瘤小鼠端粒酶活性及p16和bcl-2基因表达相关性研究[D];黑龙江中医药大学;2010年

6 卜献策;中药复方对脾气虚变应性鼻炎大鼠鼻黏膜IL-2，，β1-Defensin mRNA及血清IgE表达量的影响[D];成都中医药大学;2010年

7 李蕾;蛤蚧蛋白分离提取及其抗肿瘤分子机制研究[D];广西医科大学;2011年

8 张斌;氟诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡及机制研究[D];山西医科大学;2011年

9 高恒清;硝苦汤促进兔背部人粪污染创面愈合及其预防创面过度瘢痕化的实验研究[D];泸州医学院;2011年

10 孔斌;禽网状内皮组织增生症病毒感染对肉鸡主要免疫器官白细胞介素18产生的影响[D];山东农业大学;2011年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 邓济u&;曹炬;徐蕾;;肺炎链球菌蛋白PspA诱导人类单核细胞生产炎症介质和趋化因子的研究[J];免疫学杂志;2013年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘秀财;王克霞;成军;洪源;王琦;杜佳菊;季生吉;;丙型肝炎病毒核心蛋白在大肠埃希菌中的表达及其纯化[J];中华实验和临床感染病杂志(电子版);2008年02期

2 周惠琼;江立敏;郑夔;顾耀亮;梁文燕;柯昌文;;乙型脑炎病毒膜蛋白B区多肽抗原的表达、纯化及血清学评价[J];中国人兽共患病学报;2007年01期

3 刘秀娜;潘自铁;王仙园;周娟;赵力军;胡川闽;;人乳腺珠蛋白基因亚型的原核表达及纯化[J];医学研究生学报;2006年02期

4 陈婷梅;俸家富;曹炬;文阳安;涂植光;;人胱抑素C的原核表达纯化鉴定及抗血清的制备[J];第三军医大学学报;2007年10期

5 李传芬;荆文;胡成进;;金黄色葡萄球菌膜蛋白nEBPS原核表达及抗体制备[J];放射免疫学杂志;2010年04期

6 王亚丽;王振华;曾宪垠;;疫苗佐剂胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸的研究进展[J];中国畜牧兽医;2011年06期

7 黄涛;严华;;黏膜免疫佐剂研究进展[J];微生物学免疫学进展;2007年04期

8 汪洁英;吴小南;魏东;王国治;;复合鼠疫疫苗F1+rV的免疫学研究[J];中国人兽共患病学报;2010年12期

9 石蓉;殷国荣;;CpG寡核苷酸作为黏膜佐剂的研究进展[J];国际医学寄生虫病杂志;2006年01期

10 廖源;李淑慧;胡川闽;杨洋;李君;陈冠伊;程强;;真核细胞表达基因工程抗体的研究进展[J];医学研究杂志;2011年06期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 杨秀芬;邱德文;曾洪梅;袁京京;杨怀文;;糖基化激活蛋白的分离纯化及生物功能[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年

2 胡成进;李传芬;陈英剑;孙晓明;;金黄色葡萄球菌表面蛋白EBPS原核表达系统的构建及鉴定[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

3 李传芬;胡成进;;金黄色葡萄球菌膜蛋白nEBPS原核表达及抗体制备[A];山东生物化学与分子生物学会2009年学术会议论文汇编[C];2009年

4 李传芬;胡成进;;金黄色葡萄球菌膜蛋白nEBPS原核表达及抗体制备[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年

5 李风知;林建波;李军;;外源基因在哺乳动物细胞中的表达产物抗原性和生物活性的不一致现象[A];中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编[C];1992年

6 刘松财;王佳;孙铭泽;赵宇;;鸡干扰素α1及胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年

7 陈佳玉;李凡;;丙型肝炎治疗性疫苗的实验研究[A];第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议论文集[C];2008年

8 程相朝;张春杰;李银聚;吴庭才;刘一尘;赵敏;俞晓丽;;鸡IL-18毕赤酵母表达产物部分生物学特性的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年

9 王彦妮;曾显营;田国彬;苏文;陈化兰;;AA肉鸡免疫禽流感油乳剂灭活疫苗细胞免疫应答的变化[A];第二届中国黄羽肉鸡行业发展大会会刊[C];2010年

10 杨世炳;唐久来;盛晓蓉;;人巨细胞病毒pp65DNA疫苗诱导小鼠免疫效应的研究[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 记者　章迪思 宋鹏霞;禽畜排泄物不再“惹人嫌”[N];解放日报;2005年

2 刘燕玲;湖北打造民族药物现代化平台[N];健康报;2007年

3 证券时报记者 晓甜;和宝国际携新乙醇工艺进军内地[N];证券时报;2008年

4 北京兽药研究所 蒋桃珍;脂质体佐剂的应用前景[N];中国畜牧水产报;2000年

5 高国起;基因治疗乙型肝炎前景乐观[N];健康报;2006年

6 苏静;生物活性纳米玻璃纤维成功研发[N];中国纺织报;2010年

7 蔡泽;生产生物活性饲料[N];江苏农业科技报;2006年

8 龚华萍邋宁成云;生物活性人工关节[N];科技日报;2008年

9 沈兰;佐剂：疫苗的“加速器”[N];健康报;2007年

10 赵莹;成大生物成功开发无佐剂狂犬疫苗[N];中国医药报;2005年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 白杰英;合成的人表皮生长因子及真菌免疫调节蛋白在烟草中的表达与特性分析[D];吉林大学;2006年

2 王萍;手性农药乙氧呋草黄对映体在生物体和环境中的活性及立体选择性行为的研究[D];中国农业大学;2005年

3 王洋;全碳C环DCK类似物的设计、合成及生物活性研究[D];复旦大学;2005年

4 武望婷;羧酸类芳酰腙配合物的结构、生物活性及与DNA作用初探[D];西北大学;2007年

5 明建;云南特有食药用菌活性多糖研究[D];西南大学;2008年

6 李创军;远志和华南远志的化学成分及其生物活性研究[D];中国协和医科大学;2008年

7 郭春燕;基于含N多功能配体的配合物分子的构筑、表征、性能及生物抑菌活性研究[D];西北大学;2009年

8 颜廷才;β-葡萄糖苷酶提高刺嫩芽皂甙活性方法的研究[D];沈阳农业大学;2008年

9 严琳;猪白细胞介素2（pIL-2）与猪白细胞介素6（pIL-6）的基因表达及作为疫苗佐剂的研究[D];华中农业大学;2005年

10 任继玲;动物特异性CpG ODN的设计、筛选及对疫苗的增效作用[D];吉林大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 边涛;人乳头瘤病毒16型L1/E7融合蛋白的原核表达纯化及免疫原性研究[D];河北医科大学;2005年

2 曾岩;鸡γ-干扰素基因克隆、表达及对禽流感灭活苗的免疫增强作用[D];东北农业大学;2010年

3 谢成彬;双歧杆菌完整肽聚糖对重组乙肝表面抗原佐剂效应的实验研究[D];重庆医科大学;2005年

4 张俊才;不同佐剂对卡介苗的特异性体液免疫与非特异性细胞免疫的免疫增强作用的研究[D];新疆农业大学;2001年

5 杨柳;日本血吸虫期特异性新基因Sj314C10的克隆、表达和功能分析[D];西北农林科技大学;2005年

6 毛丽伟;BTLA蛋白胞外区片段及其Mab的制备、鉴定[D];第三军医大学;2005年

7 谭洁琼;SARS-CoV S1蛋白在哺乳动物细胞的表达和纯化[D];南华大学;2005年

8 阎晓宇;中华按蚊防御素基因的克隆、表达及重组蛋白的纯化与生物活性的初步评价[D];第一军医大学;2005年

9 唐正宇;生殖支原体MgPa重组蛋白的表达、纯化及免疫活性研究[D];南华大学;2006年

10 石琴;胸膜肺炎放线杆菌毒素IV基因的克隆表达及间接ApxIVA3-ELISA方法的初步建立[D];中国农业科学院;2007年

本文编号：696811