人热休克蛋白72转染人脂肪间充质干细胞的研究
发布时间:2017-08-19 09:00
本文关键词:人热休克蛋白72转染人脂肪间充质干细胞的研究
【摘要】:目的观察人热休克蛋白72(HSP72)基因体外转染人脂肪间充质干细胞(ASCs)及其HSP72表达情况。方法通过腹部取皮术获得的皮下脂肪利用胶原酶消化法进行体外分离培养,体外扩增至第3代,用腺病毒载体系统将人源性HSP72转染至第3代ASCs,在倒置荧光显微镜下观察转染后的细胞形态和生长变化,应用实时荧光定量PCR、Western blot法鉴定HSP72在ASCs中的表达。结果皮下脂肪经消化,体外培养可获得ASCs P3代;ASCs转染24 h后,绿色荧光蛋白表达明显增强。经实时荧光定量PCR证实转基因ASCs表达HSP72m RNA在24 h后逐渐增强。Western blot检测证实转基因ASCs在24 h后出现特征条带,而空白组未出现条带。结论采用腺病毒介导的基因转染技术可将HSP72基因转染至ASCs中,并可以在HSP72m RNA和蛋白中有效表达,ASCs可以作为HSP72基因治疗的载体。
【作者单位】: 湖南师范大学第一附属医院皮肤科;第四军医大学西京医院全军整形外科研究所;湖南师范大学第一附属医院整形美容科;湖南师范大学第一附属医院病理科;
【关键词】: 热休克蛋白 脂肪干细胞 转染
【基金】:长沙市科技局基金(No:K1303034-31) 湖南省发展改革委员会一般项目(No:2013-1199-3) 湖南省研究生创新项目(No:CX2013B235)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 2001年ZUK等[1]从抽吸脂肪中发现脂肪干细胞(adipose derived stem/stromal cells,ASCs),此后关于ASCs的研究迅速增多;ASCs具有多能分化潜力,已有许多研究证明其能分化成脂肪细胞[2]、骨细胞[3]、软骨细胞[4]、心肌细胞[5]和神经细胞[6]等。目前ASCs是很有前景的干细胞;热休克
【共引文献】
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1 马丽;文辉才;眭云鹏;简雪平;;细胞辅助脂肪移植在颜面软组织凹陷畸形中的临床应用进展[J];广东医学;2014年13期
2 Qiaozhi Wang;Lile Zhou;Yong Guo;Guangyi Liu;Jiyan Cheng;Hong Yu;;Differentiation of human adipose-derived stem cells into neuron-like cells by Radix Angelicae Sinensis[J];Neural Regeneration Research;2013年35期
3 姜丽丽;刘天庆;宋克东;关水;李香琴;葛丹;;1-磷酸鞘氨醇促进间充质干细胞向心肌分化[J];生物工程学报;2013年11期
4 井乐刚;乔静;路芳;甄鑫;卢Z,
本文编号:699798
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