人血小板裂解液替代胎牛血清大规模扩增人脐带间充质干细胞

发布时间：2017-08-20 21:19

  本文关键词：人血小板裂解液替代胎牛血清大规模扩增人脐带间充质干细胞

  更多相关文章： 干细胞 脐带脐血干细胞 培养 间充质干细胞 血小板裂解液 细胞培养 成骨分化 成脂分化

【摘要】：背景:目前国内外大多数实验仍采用经典的培养基和胎牛血清进行脐带间充质干细胞培养,血清培养潜在的不安全因素限制了未来临床应用的可行性。目的:以人血小板裂解液替代胎牛血清培养、鉴定人间充质干细胞,以期进一步应用于临床低密度扩增人间充质干细胞。方法:人血小板裂解液通过反复冻融、离心、过滤、浓缩等方法制备。以IMDM为基础培养基,添加5%浓缩血小板裂解液作为实验组培养基;以添加体积分数10%胎牛血清为对照组培养基。采用酶消化法分离培养人脐带间充质干细胞,以3 000/cm2的浓度进行传代培养,待细胞扩增至P5代后,进行细胞形态与直径、免疫表型、成骨成脂分化、克隆形成率等细胞生物学特性检测,并比较两者之间的差别。结果与结论:人血小板裂解液扩增的脐带间充质干细胞形态细长,有更高的细胞累积群倍数;克隆形成检测结果显示两者形成的克隆效率差异无显著性意义,流式细胞术检测结果显示两者有相似的细胞表型,体外诱导分化显示两者都具有成骨、成脂分化能力,但人血小板裂解液扩增的间充质干细胞成骨分化能力更强。提示人血小板裂解液可以取代胎牛血清用于临床低密度扩增人间充质干细胞。
【作者单位】： 内蒙古医科大学组织胚胎学教研室;北京京蒙高科干细胞技术有限公司;
【关键词】： 干细胞 脐带脐血干细胞 培养 间充质干细胞 血小板裂解液 细胞培养 成骨分化 成脂分化
【基金】：内蒙古自治区干细胞科技创新团队资助项目(kjt0020947)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 文章亮点:文章创新性地应用人血小板裂解液低密度大规模扩增脐带间充干细胞,对比分析扩增后脐带间充干细胞的生物学特性,拟在体外建立一套简便规范、行之有效的脐带间充质干细胞分离、纯化、培养、扩增及鉴定体系。结果显示人血小板裂解液培养基可以满足脐带间充质干细胞体外

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