肝素结合血凝素通过抑制A549细胞的自噬作用增强耻垢分枝杆菌的感染能力

发布时间：2017-08-22 09:38

  本文关键词：肝素结合血凝素通过抑制A549细胞的自噬作用增强耻垢分枝杆菌的感染能力

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【摘要】：目的将肝素结合血凝素(HBHA)重组表达于耻垢分枝杆菌(MS),鉴定其对A549细胞自噬作用的影响。方法将HBHA克隆于穿梭表达质粒pMV261,构建HBHA重组载体,电转化至MS;感染A549细胞,Western blot法鉴定A549细胞微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达情况,并检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值的变化可估计自噬的水平;利用单丹磺酰尸胺(MDC)将自噬体染色后,激光共聚焦观察细胞内自噬体变化的情况;通过MS、rMS-HBHA感染A549细胞18 h,计算胞内活菌数,鉴定感染状况。结果 rMS-HBHA经42℃热诱导成功表达HBHA蛋白;相对野生型MS,重组表达HBHA蛋白的MS(rMS-HBHA)可以显著抑制A549细胞中的LC3Ⅰ和LC3Ⅱ的表达,rMS-HBHA组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值为0.625显著低于MS组2.025,表明rMS-HBHA组自噬体形成受到抑制;并且rMS-HBHA感染A549细胞18 h后胞内活菌为6.3×106,明显高于MS组1×105。结论外源性HBHA可以通过抑制A549细胞的自噬作用增强MS的感染能力。
【作者单位】： 第四军医大学西京医院检验科;
【关键词】： rMS 肝素结合血凝素 A细胞 LC 耻垢分枝杆菌
【基金】：国家自然科学基金(30872358)
【分类号】：R392
【正文快照】： 全球有1/3的人口感染结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB),我国是结核病(tuberculosis,TB)负担大国,约有5.5亿人感染MTB,极大地影响了人们的健康[1-2]。因此阐明MTB的感染机制,对于防治策略和方法的研究具有重要意义。MTB的感染机制不仅仅与巨噬细胞存在密切关系[3-6

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 郭旭光;夏勇;马越云;郝晓柯;;肺上皮细胞自噬体在结核分枝杆菌感染中保护作用的分子机制[J];现代生物医学进展;2011年21期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前9条

1 冉琳;任伯绪;龚权;;趋化因子受体CX3CR1与炎症性疾病研究进展[J];长江大学学报(自科版);2014年15期

2 翟振丽;马维红;李全忠;申炜;阳跃忠;;载脂蛋白A1诱导骨髓源性巨噬细胞向抗炎性M2型极化的作用[J];中国动脉硬化杂志;2013年10期

3 刘译聪;武洲;于维先;中西博;周延民;;巴西天然蜂胶对牙龈卟啉单胞菌激活的巨噬细胞极化的调控及机制探讨[J];口腔医学研究;2013年12期

4 曹春雨;王清;王艳林;;肿瘤相关巨噬细胞极化的研究进展[J];生命科学;2013年11期

5 于翔;陆佳嘉;王秦;于晓Y，

本文编号：718402