抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

发布时间：2017-08-24 10:02

  本文关键词：抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

  更多相关文章： 沙眼衣原体 MIP蛋白 单克隆抗体 鉴定

【摘要】：目的:制备小鼠抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法:重组MIP蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,间接ELISA法筛选阳性克隆并进行有限稀释克隆化,建立分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、类别及抗MIP蛋白特异性,IFA法鉴定单克隆抗体的衣原体种属特异性及中和能力。结果:建立了2株能稳定分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1R6H6、2L9D2),ELISA法测得培养上清效价均为1:1 600,免疫球蛋白类型分别为IgG2a和IgG1;2株单克隆抗体不仅能特异性的识别MIP重组蛋白,而且能特异性识别沙眼衣原体血清型A、D、L2所编码的内源性MIP蛋白,但不识别其他衣原体优势蛋白及MoPn、AR39和6BC;体外中和试验表明,2株单克隆抗体均能有效中和衣原体的感染性。结论:获得了有活性的能特异性识别MIP蛋白的单克隆抗体,为深入研究MIP蛋白的结构和功能奠定了基础。
【作者单位】： 南华大学医学院病原生物学研究所;南华大学医学院肿瘤研究所;
【关键词】： 沙眼衣原体 MIP蛋白 单克隆抗体 鉴定
【基金】：国家自然科学基金(No.81202374) 湖南省自然科学基金(No.12JJ3113) 湖南省高校科技创新团队(湘教通[2010]212号)等基金资助
【分类号】：R392.7
【正文快照】： 沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是严格真核细胞内寄生的革兰氏阴性细菌,根据主要外膜蛋白MOMP抗原性的不同,可分为19个血清型。其中A、B、Ba、C型主要感染眼结膜上皮细胞引起沙眼,D-K型主要感染生殖道黏膜上皮细胞引起性传播疾病。随着人类生活水平的提高和居住环境的

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 陆春雪;曾浩;吴移谋;彭波;胡四海;蔡恒玲;李忠玉;钟光明;;沙眼衣原体蛋白水解酶CT841在感染细胞中的定位及抗原性研究[J];免疫学杂志;2012年03期

2 王华丽;吴移谋;郑江花;朱翠明;李忠玉;周洲;余敏君;;肺炎嗜衣原体CPAF重组蛋白致小鼠肺组织炎症及对炎症细胞因子的影响[J];中国免疫学杂志;2011年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 杨明生;钱俊华;丁兴红;谭珍;石筱林;何赛琳;王君英;潘晓英;;肺炎衣原体感染与儿童哮喘急性发作的关系研究[J];中华医院感染学杂志;2013年13期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 李忠玉;吴移谋;黄秋林;钟光明;周洲;粟盛梅;;质粒蛋白pORF5在沙眼衣原体感染细胞中的定位及免疫原性研究(英文)[J];免疫学杂志;2011年02期

2 郑江花;吴移谋;刘佳强;刘广超;陈超群;;肺炎嗜衣原体蛋白酶样活性因子免疫优势区基因重组蛋白在早期诊断中的应用[J];微生物学报;2008年04期

3 刘玮;何平;成蓓;梅春丽;王彦富;万晶晶;;肺炎衣原体对SR-A1和CD36表达的影响及相关信号机制研究[J];中国免疫学杂志;2009年11期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 肖瑛;李富荣;杜宗孝;孙荣德;;男性尿道感染病原学检测120例报告[J];宁夏医学杂志;2008年05期

2 肖木洲;郭卫真;郑惠红;杨平英;蓝红云;;301例疑为慢性尿道炎男性患者多种病原体检测分析[J];现代医药卫生;2006年11期

3 杨成勇,汪美先;沙眼衣原体单克隆抗体的研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;1987年01期

4 关洁;袁鹰;郭秀玲;范桂芝;李荣德;;筛选抗沙眼衣原体单克隆抗体的微量免疫酶斑点法的建立[J];首都医科大学学报;1988年02期

5 孙振声;;育龄妇女盆腔炎症患者中衣原体及支原体感染的流行[J];国际皮肤性病学杂志;1989年06期

6 李凯年;沙眼衣原体血清型特异性和血清组特异性主要外膜蛋白决定簇的保护性单克隆抗体[J];国际免疫学杂志;1990年02期

7 杨书豪,郑蓬举,王玉珠,边倩茹,徐海燕,刘昊,张晨;抗沙眼衣原体单克隆抗体的制备及初步应用[J];中国皮肤性病学杂志;2004年05期

8 夏云;;沙眼衣原体分型的研究进展[J];国外医学(微生物学分册);1997年04期

9 李永哲，倪安平，，汪波，徐英春，原英，廖昭荣;应用荧光免疫法检测泌尿生殖道沙眼衣原体[J];中华医学检验杂志;1995年01期

10 李金龙;;淋球菌、支原体和沙眼衣原体在慢性前列腺炎中的感染分布及耐药性分析[J];中国医学文摘.内科学;2003年06期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 侯淑萍;刘原君;姚卫峰;胡春燕;齐蔓莉;王惠平;刘全忠;;抗衣原体噬菌体衣壳蛋白VP1单克隆抗体的制备和应用研究[A];中华医学会第十五次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2009年

2 吴仁孝;相军;刘官信;;新生儿沙眼衣原体结膜炎[A];新世纪全国首届小儿综合研究学术会议论文汇编[C];2001年

3 郑英如;李力;胡珊;郭建新;颜耀华;;女性生殖道沙眼衣原体和解脲支原体感染与输卵管性不孕症的关系的研究[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年

4 马乐好;阚方琦;;沙眼衣原体感染及其实验诊断[A];山东预防医学会首届学术年会资料汇编[C];2003年

5 黄祝娟;;225例盆腔炎患者解脲支原体及沙眼衣原体的检测及疗效分析[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年

6 叶兴东;戴向农;黎小东;余丹丹;费实;汤少开;黄雪梅;任泽舫;朱慧兰;;测序法对广州地区沙眼衣原体omp1基因分型及突变研究[A];中华医学会第16次全国皮肤性病学术年会摘要集[C];2010年

7 邢卫斌;彭军;马冬梅;门剑龙;;UF-100尿沉渣全自动检测仪检测体外抗菌素抗衣原体活性[A];全国性与生殖医学学术研讨会论文汇编[C];2004年

8 徐爽;徐焱;;单克隆抗体在输血领域的应用探讨[A];中国输血1999年年会暨纪念ABO血型发现100周年学术交流论文专辑[C];1999年

9 俞小元;;沙眼衣原体和解脲支原体感染的探讨[A];纪念卓越的人民医学家林巧稚大夫诞辰100周年——全国妇产科高级学术论坛论文集[C];2001年

10 李安民;;单克隆抗体标载的~(131)I治疗恶性脑胶质瘤Ⅱ期临床试验的三种给药途径的研究[A];第一届中国肿瘤靶向治疗技术大会论文集[C];2003年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 贾超时邋李德成;单克隆抗体产业研发项目将落户大庆[N];大庆日报;2008年

2 小许;市领导会见美国生物医药巨头[N];无锡日报;2010年

3 姜海;英科学家发现单克隆抗体[N];科技日报;2007年

4 本报特约撰稿人 李朝;单抗：生物医药发展的主旋律[N];医药经济报;2006年

5 记者 项铮;赛诺菲巴斯德研制抗狂犬病单克隆抗体[N];科技日报;2008年

6 记者 杨俊坚;单抗药物：站在同一起跑线[N];医药经济报;2011年

7 张蕾;治疗用单克隆抗体[N];光明日报;2002年

8 李晓;“苏州系列”单克隆抗体走向世界[N];苏州日报;2008年

9 张骁束;梅英;单克隆抗体的研究进展[N];中国医药报;2003年

10 邹平;单克隆抗体研究取得突破[N];医药经济报;2001年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 唐琳;肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究[D];重庆医科大学;2005年

2 侯桂华;巨噬细胞移动抑制因子在同种移植排斥中作用及其机理的研究[D];山东大学;2004年

3 高勇;新型单克隆抗体荧光探针染料的合成及免疫荧光组织化学应用[D];西北大学;2006年

4 江敏;大鼠单克隆抗体的制备、鉴定、基因克隆、抗原分析以及药物偶联物的抗肿瘤作用研究[D];中国协和医科大学;1996年

5 秦迎松;人促血液血管细胞生成素（Haemangiopoietin, HAPO）单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年

6 万忠海;抗PEA单抗和单链抗体制备及在绿脓感染中的应用[D];吉林大学;2008年

7 吕大伟;抗RANKL单克隆抗体在大鼠类风湿性关节炎模型中的应用及RANKL转录调控的探索性研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年

8 庄国洪;抗DR4、DR5单克隆抗体诱导胶质瘤细胞株凋亡的研究[D];吉林大学;2004年

9 付建芳;溶藻弧菌抗独特型抗体基因工程疫苗的研究[D];第四军医大学;2005年

10 王晓洁;对虾白斑症病毒快速检测试剂盒的研制及其应用[D];中国海洋大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 左建宏;沙眼衣原体Omp2的表达、纯化及其单克隆抗体的研制与鉴定[D];南华大学;2005年

2 黄子逸;LIGHT基因转染细胞株和单克隆抗体的研制及其对T细胞的共刺激效应[D];苏州大学;2010年

3 李铁民;抗P-选择素单克隆抗体对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的作用实验研究[D];中国医科大学;2003年

4 李晓龙;肝癌相关抗原SMP30 mRNA在癌细胞中的表达及其单克隆抗体的制备[D];广西医科大学;2010年

5 郑杰;分泌抗猪流感病毒（河南株）单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备、鉴定和初步应用[D];河南农业大学;2004年

6 邵炜慧;盐酸克伦特罗单克隆抗体的研制及初步应用[D];扬州大学;2005年

7 杨宁;纳豆激酶的纯化及其单克隆抗体的制备鉴定[D];山西农业大学;2005年

8 唐琦;抗麻痹性贝毒素GTX2，3单克隆抗体的制备及特性分析[D];暨南大学;2005年

9 贾娟娟;抗胰岛素单克隆抗体的研制及酶联免疫分析方法的建立[D];中国原子能科学研究院;2005年

10 李彬;TLR4单克隆抗体诱导同种心脏移植免疫耐受的研究[D];苏州大学;2010年

本文编号：730628