低温冻存对兔脂肪间充质干细胞部分生物学特性的影响

发布时间：2017-08-24 11:14

  本文关键词：低温冻存对兔脂肪间充质干细胞部分生物学特性的影响

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【摘要】：目的研究低温冻存对兔脂肪间充质干细胞部分生物学特性的影响。方法采用组织块法分离培养兔脂肪间充质干细胞。用倒置显微镜观察原代细胞的细胞形态,流式细胞仪检测兔脂肪间充质干细胞的免疫表型。取第3代兔脂肪间充质干细胞置于-196℃液氮保存半年,37℃复苏并传至第7代。实验分为两组,实验组为冻存复苏后传至第7代的兔脂肪间充质干细胞,对照组为未冻存的第7代兔脂肪间充质干细胞,用MTT绘制其生长曲线;添加成脂、成骨诱导液进行诱导,油红O、茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测分别进行鉴定。结果体外培养的兔脂肪间充质干细胞呈梭形纤维样细胞形态,生长力旺盛。流式细胞仪检测显示,第3代兔脂肪间充质干细胞强表达CD44、CD90,阴性表达造血细胞相关的表面标志CD45。两组细胞生长曲线呈典型的"S"形,无统计学差异(P0.05);成脂诱导14 d后,油红O染色呈阳性;成骨诱导2周时茜素红染色阳性,ALP表达活性随成骨诱导时间延长不断增加且无统计学差异(P0.05)。结论冻存后的兔脂肪间充质干细胞体外生长及多向分化潜能未发生显著变化。
【作者单位】： 解放军广州军区武汉总医院医学实验科;
【关键词】： 间充质干细胞 免疫表型 成脂诱导 成骨分化 低温冻存
【分类号】：R329
【正文快照】： 脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchy-mal stem cells,ADMSCs)来源于脂肪组织,具有自我更新、多向分化潜能、对自体损伤小、免疫原性弱、自体移植不发生排斥反应等特点,是组织工程中最有应用前景的种子细胞之一,特别是在骨组织再生利用中具有重要的意义[1-3]。兔脂肪间

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