高效液相色谱-柱后同位素稀释质谱法定量分析人血清中转铁蛋白及白蛋白

发布时间：2017-08-29 05:44

  本文关键词：高效液相色谱-柱后同位素稀释质谱法定量分析人血清中转铁蛋白及白蛋白

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【摘要】：建立了高效液相色谱(HPLC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用,同时结合柱后同位素稀释法,通过直接测定硫及铁元素,实现蛋白质绝对定量的分析方法。选取分子量不同的4种标准蛋白:转铁蛋白、β乳球蛋白、肌红蛋白和溶菌酶作为混合蛋白,34S或54Fe同位素稀释剂与液相色谱洗脱液经三通混合后,在线进入ICP-MS检测。根据同位素稀释法公式及蛋白中硫、铁的含量计算混合蛋白中每种蛋白的浓度,与天平称量结果一致,对方法进行了验证。将方法应用到人血清转铁蛋白、白蛋白的定量分析,针对两种蛋白含量差别大导致的信号差异,通过改变同位素稀释剂的流速,成功测定了人血清中转铁蛋白、白蛋白的含量。采用34S及54Fe同位素稀释剂分别定量的血清中转铁蛋白浓度为(2.35±0.01)g/L和(2.22±0.13)g/L,结果基本吻合。方法精密度RSD均小于10%,可用于基体样品中含硫蛋白及金属蛋白的定量分析。
【作者单位】： 北京化工大学材料科学与工程学院;中国计量科学研究院;
【关键词】： 同位素稀释 蛋白质定量 电感耦合等离子体质谱 转铁蛋白 白蛋白
【基金】：国家质检总局公益性行业科研专项(No.201110008)资助项目
【分类号】：R341;O657.63
【正文快照】： 1引言蛋白质组学的快速发展,不但需要准确鉴定蛋白质,还要求对处于动态变化的蛋白质进行定量分析[1~4]。目前比较成熟的定量方法多是基于稳定同位素标记的生物质谱[5,6],但是生物质谱的信号响应与蛋白质或肽段含量间的关系十分复杂,没有蛋白质标准作归一化处理,很难对蛋白质

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本文编号：751657