Rac1对L02肝细胞株上皮细胞间质转化及增殖和凋亡的影响

发布时间：2017-08-31 16:40

  本文关键词：Rac1对L02肝细胞株上皮细胞间质转化及增殖和凋亡的影响

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【摘要】：目的检测Rac1在TGF-β1诱导的L02细胞上皮间质转化中的作用,及其对细胞增殖和凋亡的影响。方法应用不同活性的Rac1质粒pExRed-NLS Flag(空载体组)、pExRed-NLS Flag Rac1(野生型Rac1组)、pExRed-NLS Flag Rac1T17N(显性负调控Rac1组)、pExRed-NLS Flag Rac1G12V(持续活化型Rac1组)瞬时转染L02细胞,经5 ng/ml TGF-β1处理细胞。采用免疫印迹法检测融合蛋白Flag-Rac1表达,采用细胞免疫荧光及免疫印迹法检测Ck8和Vimentin表达,采用细胞划痕实验及Transwell法检测细胞迁移能力。使用不同浓度的Rac1特异性抑制剂NSC23766处理L02细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果四组质粒均成功瞬时转染到L02细胞中;与空载体组和野生型Rac1组比,持续活化型Rac1转染细胞Vimentin蛋白表达水平显著增高,CK8蛋白表达水平降低,细胞迁移能力增加;与空载体组和野生型Rac1组比,显性负调控Rac1转染细胞Vimentin蛋白表达水平降低,CK8蛋白表达水平增高,细胞迁移能力降低(P0.05);在NSC23766处理L02细胞后,细胞增殖被抑制,但各处理组细胞凋亡无明显差异。结论 Rac1可促进TGF-β1诱导的L02肝细胞株上皮间质转化和细胞增殖,但对细胞凋亡无明显影响。
【作者单位】： 东南大学医学院;南京大学医学院附属鼓楼医院消化科;
【关键词】： L细胞 Rac 上皮间质转化 增殖 凋亡
【基金】：江苏省自然科学基金资助项目(BK2011094)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 上皮细胞间质转化(epithelial-to-mesenchymaltransition,EMT)是指具有极性的上皮细胞转化成具有活动能力、能够在细胞基质间自由移动的间质细胞,以上皮细胞极性的丧失和间质特性的获得为重要特征[1]。近年来,已有研究发现肝上皮细胞可通过EMT参与细胞外基质的合成与分泌[2]。

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