血清型2型猪链球菌烯醇化酶参与猪链球菌抗吞噬作用
本文关键词:血清型2型猪链球菌烯醇化酶参与猪链球菌抗吞噬作用
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【摘要】:目的制备高纯度的猪链球菌烯醇化酶(SsEno)重组蛋白并通过抗体封闭实验评价SsEno对猪链球菌抗吞噬能力的影响,鉴定其与人纤维蛋白原(hFg)结合的活性。方法构建hisSsEno重组表达质粒,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况,镍柱亲和纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证。用hisSsEno免疫兔制备其高滴度的抗血清并通过人全血杀伤模型评价Eno对猪链球菌抗吞噬能力的影响。采用ELISA和Far-Western blot法鉴定hisSsEno与hFg结合活性。结果成功构建了His标签蛋白原核表达质粒并获得了高纯度的hisSsEno重组表达蛋白。SsEno免疫的抗血清能显著降低强致病的猪链球菌05ZYH33在人全血中的存活能力。hisSsEno能特异地与hFg结合。结论获得了hisSsEno重组表达蛋白,通过抗体阻封和全血杀伤模型发现SsEno是猪链球菌潜在的抗吞噬因子,且hisSsEno能特异性结合hFg。
【作者单位】: 首都医科大学燕京医学院;
【关键词】: 血清型型猪链球菌 烯醇化酶 抗吞噬 人纤维蛋白原 相互作用
【基金】:国家自然科学基金(30870091)
【分类号】:R378.12;R392-33;R446.61
【正文快照】: 血清型2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,SS2)是一种新的人兽共患病病原菌,截止到2009年全球人感染猪链球菌病例已高达853例,而中国人感染病例数最多(332例)[1]。近几年又发现了猪链球菌耐药菌株的出现[2]和临床复发病例,需要接受长期的治疗[3]。猪链球菌的临床表征
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,本文编号:766923
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