CD59促进LAT介导的T细胞活化

发布时间：2017-09-03 21:29

  本文关键词：CD59促进LAT介导的T细胞活化

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【摘要】：目的:研究CD59分子在LAT(Linker for activated T cells)介导的T系淋巴细胞活化中所起的作用。方法:构建LAT-GFP融合蛋白,以逆转录病毒为载体转染Jurkat细胞,建立稳定转染细胞株(Jurkat-GFP)。分别使用CD59抗体刺激和pSUPER-siCD59干扰质粒(GFP标记)沉默Jurkat-GFP细胞。免疫荧光观察CD59和LAT分子在细胞膜的表达和定位;MTT比色法检测细胞增殖率的变化;Western blot检测LAT活化信号转导通路中相关蛋白分子磷酸化水平。结果:荧光显微镜下可见Jurkat-GFP细胞绿色荧光表达于细胞膜,转染干扰质粒后细胞膜和细胞质均有绿色荧光表达。激光共聚焦显微镜下可见CD59抗体刺激前CD59和LAT分子均匀分布于细胞膜,且转染干扰质粒的Jurkat-GFP细胞CD59表达量下降。CD59抗体刺激后CD59分子和LAT分子点状聚集共定位于细胞膜。MTT结果表明相对于正常Jurkat-GFP细胞,抗体活化后细胞增殖速率明显升高(P0.05),而电转干扰质粒后细胞生长减慢。Western blot结果表明,CD59抗体刺激后细胞ZAP-70、LCK、PLC-r总蛋白表达无明显差异(P0.05),而磷酸化蛋白表达显著增高(P0.05)。结论:抗体活化后细胞膜上CD59和LAT分子聚集并共定位于细胞膜,且细胞信号转导通路下游分子磷酸化水平增高,进一步证实CD59分子经抗体活化后可促进LAT介导的T细胞信号转导。
【作者单位】： 青岛大学医学院免疫学教研室;
【关键词】： CD LAT Jurkat siCD 蛋白磷酸化
【基金】：国家自然科学基金项目(No.H1003)资助
【分类号】：R392.11
【正文快照】： CD59相对分子量18~20 kD,其基因定位于人类第11号染色体短臂上,配体为CD2。广泛表达于人外周血白细胞、红细胞和其他多种细胞,缺乏胞内段,通过棕榈酰基团锚固于细胞膜。细胞活化后CD59分子被募集于细胞膜脂筏(Lipid rafts)区域。CD59抗体在共刺激信号存在下可诱导T淋巴细胞早，

本文编号：787434