肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析

发布时间：2017-09-05 06:19

  本文关键词：肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析

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【摘要】：目的利用Red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5'端与ppk基因同源,3'端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pKD46质粒的EHEC O157:H7 EDL933w感受态细菌,然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中;利用pKD46介导的Red重组系统,通过同源重组替换EHEC O157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和测序验证;通过革兰染色、测D600值、吉姆萨染色比较EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157:H7 EDL933w突变菌株(EHEC O157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用Red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。
【作者单位】： 南方医科大学公共卫生与热带医学学院BSL-3实验室;
【关键词】： EHECO H ppk基因 Red重组系统 基因突变
【基金】：国家自然科学基金(81371765) 广东省自然科学基金(S2013010014393)~~
【分类号】：R378.21;R3416
【正文快照】： 肠出血型大肠埃希菌(enterohemorrhagicEscherichia coli,EHEC)O157:H7可引起人出血性结肠炎(hemorrhagic colitis,HC)、溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)以及血栓形成性血小板减少性紫癜(thrombotic thrombocytopenicpurpura,TTP)等[1]。在大肠埃希菌中,多聚

【参考文献】

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1 王恒，

本文编号：796336