羟丙基甲基纤维素在脐血干细胞分离中应用

发布时间：2017-09-05 13:15

  本文关键词：羟丙基甲基纤维素在脐血干细胞分离中应用

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【摘要】：目的探讨羟丙基甲基纤维素在人脐血间充质干细胞(MSCs)分离中应用的可行性及分离效果。方法对脐血样本先用生理盐水稀释,然后分别加入3种不同沉降因子(羟丙基甲基纤维素,明胶和羟乙基淀粉),血液、生理盐水、沉降因子比例为2:1:3,混匀后静置至界面分层清晰时记录时间;用Percoll液对上清液进一步分离,计数回收MSCs量与存活数;将MSCs进行培养、传代,传到第3、20代及液氮冻存6个月后复苏再传至35代时用流式细胞仪检测CD44、CD90、CD105,CD34、CD45表达。结果羟丙基甲基纤维素沉降红细胞速度最快,仅需15 min,明胶和羟乙基淀粉均需要30 min左右,差异具有统计学意义(P0.05);0.1%~0.3%羟丙基甲基纤维素对脐血MSCs回收量在(6.24~6.72)×106个/m L,高于4%~8%羟乙基淀粉对脐血MSCs回收量[(5.12~6.88)×106个/m L)],明显高于0.3%~0.6%明胶对脐血MSCs回收量[(2.08~2.56)×106/m L)],差异均具有统计学意义(P0.05);羟丙基甲基纤维素回收MSCs的存活率最高,高于明胶和羟乙基淀粉,差异具有统计学意义(P0.05);用羟丙基甲基纤维素分离、培养的MSCs传到第3、20代及液氮冻存6个月复苏后传到第35代,CD44、CD90、CD105表达均呈阳性,CD34、CD45表达呈阴性,符合干细胞表面标志特征。结论羟丙基甲基纤维素可以用于脐带血MSCs分离(最适宜浓度为0.2%),效果优于常用的分离试剂明胶和羟乙基淀粉。
【作者单位】： 沈阳军区202医院;沈阳医学院公共卫生学院;
【关键词】： 脐带血 间充质干细胞(MSCs) 沉降因子 羟丙基甲基纤维素
【分类号】：R329
【正文快照】： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是目前倍受关注的一类具有自我更新能力和多向分化潜能的组织干细胞,可以从骨髓、肝脏、脂肪等组织获得。MSCs虽然来源于中胚层,但在特定条件下,可分化为各胚层的多种细胞或组织[1~4],如骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、神经

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