SD大鼠原代胰岛细胞分离、纯化及培养技术的改进

发布时间：2017-09-06 09:02

  本文关键词：SD大鼠原代胰岛细胞分离、纯化及培养技术的改进

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【摘要】：目的:探讨大鼠胰岛细胞分离、纯化及培养的方法,并评价其生物学功能。方法:选用8~10周龄健康SD大鼠,采用胆总管逆行注射预冷胶原酶P溶液,37℃水浴静止消化,30目不锈钢筛网过滤,Ficoll400非连续密度梯度离心纯化。分离后的胰岛用DTZ染色计算胰岛产量,胰岛素释放试验评价其生物学功能。结果:胰岛细胞分布于Ficoll400浓度为23%~20%和20%~11%的界面之间。DTZ染色呈红色细胞团,胰岛产量为(606±56)IEQ/胰腺。纯度高达80~90%,活率≥90%,胰岛素释放功能良好。结论:胶原酶P溶液原位消化,Ficoll400纯化是一种高效简便的胰岛分离方法,分离的胰岛细胞数量多、纯度高及活性好。
【作者单位】： 复旦大学附属上海市第五人民医院内分泌科;
【关键词】： SD大鼠 胰岛细胞培养 胰岛素
【基金】：上海市卫生局青年基金(2010Y042) 闵行区科委自然基金(2010MHZ026)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 前言随着社会的发展,人们饮食习惯及环境的改变,糖尿病的发病率日益升高,与心脑血管疾病和恶性肿瘤一起成为严重威胁人类健康的重大难题,目前临床对于糖尿病的治疗没有特别有效的方法,多数为饮食控制、运动降糖,同时给予药物刺激胰岛分泌胰岛素或者补充人工合成的胰岛素,胰岛

【参考文献】

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本文编号：802193