链球菌溶血素O抗原的原核表达及条件优化

发布时间：2017-09-10 21:25

  本文关键词：链球菌溶血素O抗原的原核表达及条件优化

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【摘要】：目的构建链球菌溶血素O抗原(SLO)的重组表达质粒,并优化其在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法以A群链球菌DNA为模板,采用PCR法扩增SLO基因,将扩增的基因连接pET-32a(+)表达载体构建pET-32a(+)-SLO重组质粒,重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,转化后的表达菌经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导和自诱导的方式分别诱导及纯化,最终确定最佳的表达条件。结果 PCR扩增的基因大小与SLO基因大小一致,测序完全正确。不同浓度的IPTG诱导均为包涵体表达,且表达量均较低;自诱导的方式,不仅表达量明显提高,且实现了部分可溶性表达。结论成功构建了SLO的原核表达质粒,优化筛选出能高效可溶性表达的诱导条件,纯化获得了SLO重组融合蛋白质,为进一步的基础及临床研究应用奠定基础。
【作者单位】： 南京军区鼓浪屿疗养院检验科;
【关键词】： 链球菌溶血素O抗原 包涵体 自诱导 蛋白纯化
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 链球菌溶血素O抗原(streptolysin O,SLO)是溶血性链球菌的代谢产物之一,具有溶血作用和强抗原性。溶血性链球菌感染后患者体内可检出SLO抗体,临床通过检测血清中有无SLO抗体产生(抗SLO试验),可以诊断患者近期是否感染过溶血性链球菌,也可以用于辅助诊断风湿热、肾小球肾炎等[1

【参考文献】

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本文编号：826741