三种人脐静脉内皮细胞的培养鉴定及表面抗原表达比较

发布时间：2017-09-12 05:14

  本文关键词：三种人脐静脉内皮细胞的培养鉴定及表面抗原表达比较

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【摘要】：目的探索建立稳定有效的原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外培养方法,并比较原代HUVECs与HUVEC-CS、EA.hy926细胞株之间的表面抗原表达情况。方法Ⅱ型胶原酶消化人脐静脉分离HUVEC,M199完全培养液培养,HUVEC-CS及EA.hy926用DMEM完全培养液。胰蛋白酶消化传代,对三种细胞进行形态学观察,流式细胞仪分析比较表面抗原的表达率。结果原代HUVECs细胞为多角形,"铺路石样"排列;HUVEC-CS和EA.hy926细胞为圆形或扁平形,生长速度快,呈典型"鹅卵石状排列。v WF因子免疫荧光染色:原代HUVECs及EA.hy926大部分细胞内可见绿色荧光,而HUVEC-CS为阴性。流式细胞仪分析原代HUVECs(77.7%)或EA.hy926(78.6%)CD31表达率明显高于HUVEC-CS(4.2%),原代HUVECs CD34表达率(43.3%)明显高于HUVEC-CS或EA.hy926(分别为1.6%、0.2%),差异有统计学意义。结论脐静脉灌注Ⅱ型胶原酶消化法配合M199完全培养液可获得高纯度的内皮细胞,EA.hy926永生细胞株培养方法简单,短时间内可获得足够数量的细胞,两者均是组织工程及相关医学基础研究较好的细胞来源。
【作者单位】： 云南省第一人民医院口腔内科;昆明医科大学第一附属医院心内科;
【关键词】： 原代人脐静脉内皮细胞 细胞株 细胞培养 表面抗原表达
【分类号】：R329
【正文快照】： 血管和神经的分化与新生对于损伤口腔黏膜的再生修复至关重要,口腔黏膜损伤时内皮细胞可分泌血管生成因子以促进损伤黏膜的局部愈合,内皮细胞的损伤也可能参与了人口腔黏膜干细胞的迁移和分化过程[1-2]。血管内皮细胞的分离和培养对于了解正常血管新生和血管病理生理等过程起

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本文编号：835288